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兔外周血單個核細胞

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更新時間:2023-04-23 09:58:37瀏覽次數:324

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產品簡介

供貨周期 現貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 血液組織
兔外周血單個核細胞的相關產品:人乳腺癌組織源細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶AGS (人胃腺癌細胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶NCI-H1650 (人非小細胞肺癌細胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶DLD-1 (人結直腸腺癌上皮細胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶NCI-H295R (人腎上腺皮質腺癌細胞) (STR

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

兔外周血單個核細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

血液組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。外周血單個核細胞(PBMC)即外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。目前,主要的分離方法是密度梯度離心法,因為血液中各有形成分的比重存在差異,因此得以分離出不同的細胞。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  懸浮

細胞形態(tài)  圓形

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

L型鈣通道蛋白抗體 周期B1封閉多肽 

人類白細胞抗原G抗體 EXOSC4蛋白封閉多肽 

SERTAD4蛋白抗體 S1-Tag多肽 

三磷腺苷結合盒亞家族G1抗體 絲氨45封閉多肽 

溶質載體轉運蛋白家族35成員D3抗體 磷丙糖異構封閉多肽 

血管粘附蛋白1抗體 神經束蛋白186封閉多肽 

防御β-124/β-defensin 124抗體 神經肽Y1受體封閉多肽 

PE標記小鼠抗人CD34單克隆抗體 表皮生長因子樣蛋白Megf10封閉多肽 

β內酰胺樣蛋白抗體 10號染色體開放閱讀框96封閉多肽 

MSH5蛋白抗體 細胞分裂周期蛋白2封閉多肽 

轉錄因子HES2抗體 鈣結合蛋白D28K封閉多肽 

親核β1抗體 LSMD1蛋白封閉多肽 

ENTPD4蛋白抗體 δ氨基乙酰丙脫水封閉多肽 

英文名稱: Cdk2 睪丸特異表達新基因5封閉多肽 

乳糖樣蛋白抗體 甲狀腺激受體相關蛋白3封閉多肽 

英文名稱: RAGE 瘦受體封閉多肽 

英文名稱: Digoxin(2E2) 螺旋轉錄因子OTP封閉多肽 

α1微球蛋白單克隆抗體 雞新城疫血凝-神經氨封閉多肽 
兔外周血單個核細胞小鼠肺大靜脈內皮細胞培養(yǎng)基100mL小鼠肺大靜脈內皮細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持小鼠肺大靜脈內皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含小鼠肺大靜脈內皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠肺大靜脈內皮細胞的體外培養(yǎng)。

DMEM高糖(不含鈉)500mL-

Grace's昆蟲細胞培養(yǎng)基500mL-

293A細胞專用培養(yǎng)基125mL×4293A細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持293A細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含293A細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于293A細胞的體外培養(yǎng)。

MEM (含NEAA)(定制pH)500ml-

M1細胞專用培養(yǎng)基125mL×4M1細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持M1細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含M1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于M1細胞的體外培養(yǎng)。

大鼠淋巴結淋巴細胞培養(yǎng)基100mL大鼠淋巴結淋巴細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持大鼠淋巴結淋巴細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含大鼠淋巴結淋巴細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠淋巴結淋巴細胞的體外培養(yǎng)。

 


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