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兔外周血單個(gè)核細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 09:58:37瀏覽次數(shù):305

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 血液組織
兔外周血單個(gè)核細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人乳腺癌組織源細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶AGS (人胃腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶NCI-H1650 (人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶DLD-1 (人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶NCI-H295R (人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞) (STR

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

兔外周血單個(gè)核細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

血液組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱(chēng)為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類(lèi)開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)即外周血中具有單個(gè)核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。目前,主要的分離方法是密度梯度離心法,因?yàn)檠褐懈饔行纬煞值谋戎卮嬖诓町?,因此得以分離出不同的細(xì)胞。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用取外周血、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái)制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)過(guò)檢測(cè),且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  懸浮

細(xì)胞形態(tài)  圓形

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

L型鈣通道蛋白抗體 周期B1封閉多肽 

人類(lèi)白細(xì)胞抗原G抗體 EXOSC4蛋白封閉多肽 

SERTAD4蛋白抗體 S1-Tag多肽 

三磷腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體 絲氨45封閉多肽 

溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族35成員D3抗體 磷丙糖異構(gòu)封閉多肽 

血管粘附蛋白1抗體 神經(jīng)束蛋白186封閉多肽 

防御β-124/β-defensin 124抗體 神經(jīng)肽Y1受體封閉多肽 

PE標(biāo)記小鼠抗人CD34單克隆抗體 表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白Megf10封閉多肽 

β內(nèi)酰胺樣蛋白抗體 10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框96封閉多肽 

MSH5蛋白抗體 細(xì)胞分裂周期蛋白2封閉多肽 

轉(zhuǎn)錄因子HES2抗體 鈣結(jié)合蛋白D28K封閉多肽 

親核β1抗體 LSMD1蛋白封閉多肽 

ENTPD4蛋白抗體 δ氨基乙酰丙脫水封閉多肽 

英文名稱(chēng): Cdk2 睪丸特異表達(dá)新基因5封閉多肽 

乳糖樣蛋白抗體 甲狀腺激受體相關(guān)蛋白3封閉多肽 

英文名稱(chēng): RAGE 瘦受體封閉多肽 

英文名稱(chēng): Digoxin(2E2) 螺旋轉(zhuǎn)錄因子OTP封閉多肽 

α1微球蛋白單克隆抗體 雞新城疫血凝-神經(jīng)氨封閉多肽 
兔外周血單個(gè)核細(xì)胞小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM高糖(不含鈉)500mL-

Grace's昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng)基500mL-

293A細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4293A細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持293A細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含293A細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于293A細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MEM (含NEAA)(定制pH)500ml-

M1細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4M1細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持M1細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含M1細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于M1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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