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兔骨髓單核細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 11:45:20瀏覽次數(shù):285

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 骨髓
兔骨髓單核細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-28人皮膚黑色瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106SK-MES-1人肺鱗癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106SK-N-BE(2)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106SK-N-MC人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106SK-NEP-1人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單核細(xì)胞是一種未成熟的單核細(xì)胞,在骨髓細(xì)胞中約占0.04%,被認(rèn)為是破骨細(xì)胞的前體細(xì)胞,較外周血單個(gè)核細(xì)胞誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞得率高、全骨髓誘導(dǎo)法產(chǎn)生的破骨細(xì)胞數(shù)量多,純度高,較脾細(xì)胞誘導(dǎo)法分化效率高。骨髓單核細(xì)胞(BMMNCs)是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來(lái)的原代細(xì)胞,它屬干細(xì)胞類型。目前,大多數(shù)研究用淋巴細(xì)胞分離液分離提取骨髓單核細(xì)胞,近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細(xì)胞。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  巨噬細(xì)胞樣

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

兔骨髓單核細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨髓

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

白介-1受體拮抗劑抗體 GPN3蛋白封閉多肽 人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒

磷化腫瘤抑制基因P53抗體 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白129封閉多肽 人熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒ELISA

磷化轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(CD71)抗體 整合α2(CD49b)封閉多肽 人肌球蛋白(MYS)ELISA檢測(cè)試劑盒

SGCE蛋白抗體 亮氨拉鏈結(jié)構(gòu)域蛋白R(shí)OGDI封閉多肽 人凝溶膠蛋白(GS)elisa試劑盒

細(xì)胞色P450 3A4抗體 JAGN1蛋白封閉多肽 人C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒elisa

英文名稱: S100P 黑色瘤缺失樣蛋白1封閉多肽 人醛固酮(ALD)檢測(cè)試劑盒elisa

Toll樣受體1抗體 P53凋亡刺激蛋白2封閉多肽 人肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒

英文名稱: beta-Actin (Loading Control)AbBy Fluor® G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白21封閉多肽 人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)試劑盒ELISA

zeta相關(guān)蛋白70抗體 ABI基因家族成員3結(jié)合蛋白封閉多肽 人血管生成受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨激1(Tie1)ELISA檢測(cè)試劑盒

英文名稱: c-Kit 線粒體核糖體蛋白L50封閉多肽 人血管生成2(ANG-2)elisa試劑盒

JAZF1抗體 囊包蛋白/內(nèi)披蛋白封閉多肽 人血管生成1(ANG-1)試劑盒elisa

細(xì)胞角蛋白4抗體 5號(hào)染色體開放閱讀框42封閉多肽 人血管生長(zhǎng)(ANG)檢測(cè)試劑盒elisa

RAB27B單克隆抗體 20號(hào)染色體開放閱讀框201封閉多肽 人血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒

磷化14-3-3 α/β/ζ抗體 黑色瘤抑制活性蛋白3封閉多肽 人帕金森氏病2Parkin(Park2)試劑盒ELISA

氧化應(yīng)激誘導(dǎo)生長(zhǎng)抑制因子1抗體 細(xì)胞S期激相關(guān)蛋白2封閉多肽 人紐蛋白(VCL)ELISA檢測(cè)試劑盒

沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體 LARP1蛋白封閉多肽 人軸突生長(zhǎng)誘向因子4(Ntn4)elisa試劑盒

CD8β鏈(CD8-β)抗體 微粒體S轉(zhuǎn)移1封閉多肽 人軸突生長(zhǎng)誘向因子1(Ntn1)試劑盒elisa

全細(xì)胞色C合成抗體 ras基因相關(guān)蛋白R(shí)AB41封閉多肽 人硫腦苷酯(SFT)檢測(cè)試劑盒elisa
兔骨髓單核細(xì)胞NG108-15小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞英文名稱:NG108-151×106DMEM+10%FBS+1%P/S(STR鼠源鑒定)報(bào)告

NIH/3T3小鼠胚胎細(xì)胞英文名稱:NIH/3T31×106DMEM+10%小牛血清+1%NEAA+1%鈉+1%L-+1%P/S(STR鼠源鑒定)報(bào)告

OP9小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞英文名稱:OP91×106MEMα+20%FBS +1%P/S (STR鼠源鑒定)報(bào)告

OKT11小鼠雜交瘤(抗CD2)細(xì)胞英文名稱:OKT111×106IMDM+20%FBS+1%PS(STR鼠源鑒定)報(bào)告

P19小鼠畸胎瘤細(xì)胞英文名稱:P191×106MEMα+7.5%小牛血清+2.5%胎牛血清+1%P/S (STR鼠源鑒定)報(bào)告

P388D1小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞英文名稱:P388D11×1061640+10%FBS +1%P/S(STR鼠源鑒定)報(bào)告

P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱:P8151×1061640+10%FBS+1%P/S (STR鼠源鑒定)報(bào)告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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