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小鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞

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更新時間:2023-04-21 16:20:36瀏覽次數(shù):273

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨骼肌組織
小鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞原代細胞5×105小鼠頸動脈成纖維細胞原代細胞5×105小鼠頸靜脈內(nèi)皮細胞原代細胞5×105小鼠主動脈瓣膜間質(zhì)細胞原代細胞5×105小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細胞原代細胞5×105

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

骨骼肌組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方。肌細胞內(nèi)有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段,叫做一個肌節(jié)。肌衛(wèi)星細胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維(肌細胞)外的一種扁平、有突起的細胞。著于肌纖維(肌細胞)表面;當(dāng)肌纖維(肌細胞)受損后,肌衛(wèi)星細胞可增殖分化,參與肌纖維(肌細胞)的修復(fù),因此具有干細胞性質(zhì)。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合多次差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Desmin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、馬血清、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳1-3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

NK細胞抑制性受體2DS3抗體 晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白對照品 

碳氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A4突變型抗體 神經(jīng)突觸粘附樣分子4封閉多肽 

表皮生長因子樣蛋白6抗體 鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性絲氨蛋白激封閉多肽 

Wnt蛋白家族7B抗體 重組牛PEF蛋白 

線粒體核糖體蛋白L39 巰基氧化1封閉多肽 

結(jié)合蛋白4單克隆抗體 線粒體裂變因子MFF封閉多肽 

mRNA結(jié)合蛋白抗體 線粒體復(fù)合物NDUFS7蛋白封閉多肽 

轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM1抗體 ras癌基因家族Rab11蛋白封閉多肽 

Wnt信號抑制因子1抗體 6號染色體開放閱讀框195封閉多肽 

神經(jīng)激肽A受體/K物質(zhì)受體抗體 SAPS結(jié)構(gòu)域家族2封閉多肽 

磷二羥?;D(zhuǎn)移抗體 遺傳性血色病蛋白相關(guān)蛋白1封閉多肽 

G蛋白偶聯(lián)受體γ3抗體 綠色熒光蛋白封閉多肽 

腫瘤/睪丸抗原11.3抗體 組蛋白去甲基化JMJD5封閉多肽 

非霍奇金淋巴瘤蛋白抗體 磷化絲裂原活化蛋白激1/2封閉多肽 

DMRTA2蛋白抗體 B Raf封閉多肽 

D酪氨激衰減蛋白1抗體 代謝型谷氨受體1A封閉多肽 

酪氨蛋白激A3受體抗體 溶質(zhì)載體家族22成員14封閉多肽 

線粒體促凋亡蛋白抗體 腺苷蛋氨1封閉多肽 
小鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞小鼠胰島細胞培養(yǎng)基100mL小鼠胰島細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠胰島細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠胰島細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠胰島細胞的體外培養(yǎng)。

小鼠小梁網(wǎng)細胞培養(yǎng)基100mL小鼠小梁網(wǎng)細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠小梁網(wǎng)細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠小梁網(wǎng)細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠小梁網(wǎng)細胞的體外培養(yǎng)。

SW620/GFP細胞專用培養(yǎng)基(L15)125mL×4SW620/GFP細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SW620/GFP細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SW620/GFP細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SW620/GFP細胞的體外培養(yǎng)。

McCoy's 5A無糖500mL-

小鼠臍帶間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基100mL小鼠臍帶間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠臍帶間充質(zhì)干細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠臍帶間充質(zhì)干細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠臍帶間充質(zhì)干細胞的體外培養(yǎng)。

Leibovitz's L-15培養(yǎng)基(含20%FBS)125mL×4Leibovitz's L-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷鹽和游離堿基氨基組成,代替了傳統(tǒng)的碳氫鈉緩沖系統(tǒng),同時,用半乳糖和鈉代替葡萄糖可以防止性代謝副產(chǎn)物的形成,有助于維持培養(yǎng)液PH的穩(wěn)定,適合用于非CO2平衡環(huán)境的細胞培養(yǎng)。Leibovitz's L-15培養(yǎng)基適用于猴腎細胞和HEp-2的培養(yǎng)、原代(如胚胎和成人組織)細胞分離、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等。

MLTC-1細胞專用培養(yǎng)基125mL×4MLTC-1細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MLTC-1細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MLTC-1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MLTC-1細胞的體外培養(yǎng)。

 


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