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大鼠子宮成纖維細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 11:09:13瀏覽次數(shù):288

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 子宮組織
大鼠子宮成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:HCC 38人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HCC1937人乳腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HCC827人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HCC827+LUC人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞熒光標(biāo)記人細(xì)胞系1×106HCC-94人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化) 人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠子宮成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

子宮組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時,可以引起子宮脫垂。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來;成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的子宮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。子宮成纖維細(xì)胞的主要特征:①是子宮的重要細(xì)胞組成,在體外易于培養(yǎng);②在子宮損傷后能修復(fù)和重塑子宮;③在子宮炎癥時能有效控制炎癥擴散。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

LULL1蛋白抗體 蛋氨氨肽1D封閉多肽 人細(xì)胞毒相關(guān)蛋白A(CagA)ELISA試劑盒

葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4抗體 蛋白激錨定蛋白13封閉多肽 人胃抑(GIP)試劑盒ELISA

碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移8抗體 線粒體促凋亡蛋白封閉多肽 人胃泌釋放多肽(GRP)ELISA檢測試劑盒

核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體 ATP依賴解旋DDX24封閉多肽 人胃泌釋放肽前體(ProGRP)elisa試劑盒

刺激分子B7-1蛋白抗體 X射線修復(fù)交叉互補蛋白3封閉多肽 人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)試劑盒elisa

高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體 核仁同源蛋白17封閉多肽 人促胰液/胰泌(Secretin)檢測試劑盒elisa

鹽皮質(zhì)激受體抗體 脯氨脫氫封閉多肽 人多肽YY(Peptide-YY)ELISA試劑盒

信號通路Wnt1抗體 腺苷激同工6封閉多肽 人促胃液受體(GsaR)試劑盒ELISA

軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體 磷化腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因GDIA1封閉多肽 人膽囊收縮/縮膽囊八肽(CCK-8)ELISA檢測試劑盒

Kelch樣蛋白18抗體 膜相關(guān)環(huán)指蛋白1封閉多肽 人胰原激活肽(TAP)ELISAelisa試劑盒

繆勒激2型受體抗體 轉(zhuǎn)錄同源蛋白質(zhì)CUX2封閉多肽 人α1性糖蛋白(α1-AGP)試劑盒elisa

快速骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體 非受體型酪氨蛋白激Tnk1封閉多肽 人內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)檢測試劑盒elisa

白細(xì)胞3抗體 磷化叉頭蛋白家族封閉多肽 人丙二醛(MDA)ELISA試劑盒

猴痘病毒MIR抗體 雌激受體α封閉多肽 人胰淀(Amylin)試劑盒ELISA

鈣調(diào)節(jié)/鈣調(diào)蛋白/鈣調(diào)抗體 細(xì)胞遷移誘導(dǎo)因子5封閉多肽 人血管活性腸肽(VIP)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: NF-L 鋅指蛋白193封閉多肽 人膽囊收縮/腸促肽(CCK)elisa試劑盒

鋅指蛋白185抗體 富含半胱氨蛋白3封閉多肽 人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒elisa

21號染色體開放閱讀框55抗體 6號染色體開放閱讀框203封閉多肽 人Ⅱ型膠原(ColⅡ)檢測試劑盒elisa
大鼠子宮成纖維細(xì)胞HOS人骨肉瘤細(xì)胞英文名稱:HOS1×106MEM+10%FBS+1%NEAA+1%P/S 提供STR鑒定報告

HPAC人胰腺癌細(xì)胞英文名稱:HPAC1×106D/F12+5%FBS+0.002mg/ml胰島+0.005mg/ml轉(zhuǎn)鐵蛋白+40ng/ml氫化+10ng/ml表皮生長因子EGF +1%P/S 提供STR鑒定報告

HPAF-II 人胰腺癌細(xì)胞英文名稱:HPAF-II 1×106MEM+10%FBS+1%L-+1%NEAA +1%鈉+1%P/S 提供STR鑒定報告

Hs 815.Pl人胎盤細(xì)胞(有限細(xì)胞系)英文名稱:Hs 815.Pl1×106DMEM+10%FBS+1%P/S  提供STR鑒定報告

HS578T人乳腺癌細(xì)胞英文名稱:HS578T1×106DMEM+0.01mg/ml牛胰島+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報告

HS683人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞英文名稱:HS6831×106DMEM+15%FBS+1%P/S  提供STR鑒定報告

HS746T人胃癌細(xì)胞英文名稱:HS746T1×106DMEM+10%FBS+1%P/S  提供STR鑒定報告

 


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