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小鼠乳腺上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 14:03:29瀏覽次數(shù):248

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 乳腺組織
小鼠乳腺上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:SJSA-1人骨肉瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLSJSA-1人骨肉瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLSK-BR-3人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLSK-BR-3人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLSK-BR-3+LUC人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自分離自分娩后3-5天的乳腺組織,為貼壁生長型細(xì)胞,呈多角形、圓形以及短梭形;乳腺上皮細(xì)胞主要功能即生乳功能。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠乳腺上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

乳腺組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

鋅指蛋白816A抗體 卵透明帶糖蛋白4封閉多肽 人HIV(1+2)抗原抗體ELISA試劑盒

X染色體開放閱讀框32抗體 RAB3A相關(guān)樣蛋白1封閉多肽 人H5型病毒(H5N1)抗體(IgG)試劑盒ELISA

死亡結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 鋅指蛋白638封閉多肽 人G蛋白偶聯(lián)受體152(GPR152/PGR5)ELISA檢測試劑盒

鋅指蛋白37抗體 5號(hào)染色體開放閱讀框33封閉多肽 人G蛋白偶聯(lián)受體109A(GPR109A)ELISA試劑盒

5號(hào)染色體開放閱讀框48抗體 細(xì)胞色P450 2D6封閉多肽 人G蛋白偶聯(lián)膽汁受體1(GPBAR1)試劑盒ELISA

鋅指蛋白84抗體 肝果糖激封閉多肽 人G蛋白偶聯(lián)雌激受體1(GPR30)檢測試劑盒elisa

心肌蘭尼堿受體抗體(腦肌蘭尼堿受體) 13號(hào)染色體開放閱讀框12封閉多肽 人G蛋白偶合受體44(GPR44/CRTH2/DL1R)ELISA試劑盒

FAM154A蛋白抗體 鋅指蛋白184封閉多肽 人GTPNRas(NRAS)試劑盒ELISA

22號(hào)染色體開放閱讀框29抗體 巨噬細(xì)胞清道夫受體1封閉多肽 人Gremlin-1蛋白(GREM1)ELISA檢測試劑盒

食道癌抑制生長蛋白抗體 三甲基化組蛋白H3封閉多肽 人GDP解離抑制因子2(GdI2)ELISA試劑盒

H2B組蛋白家族M蛋白抗體 磷化酪氨蛋白激受體B1封閉多肽 人GAD/IA2自身抗體試劑盒ELISA

腱糖蛋白X抗體 T淋巴細(xì)胞CD1封閉多肽 人G1/S特異性細(xì)胞周期蛋白E1(CCNE1)檢測試劑盒elisa

中性粒細(xì)胞活性蛋白2/血小板堿性蛋白抗體 鉻細(xì)胞瘤患者抑癌基因SDHB封閉多肽 人F-肌動(dòng)蛋白(F-actin)ELISA試劑盒

鋅指蛋白675抗體 組氨三聯(lián)體核苷結(jié)合蛋白3封閉多肽 人FOS 樣抗原2(FOSL2)試劑盒ELISA

PE標(biāo)記小鼠抗人CD80單克隆抗體 DNA解旋Q1樣封閉多肽 人Fc受體樣蛋白3(FCRL3)ELISA檢測試劑盒

細(xì)胞增殖誘導(dǎo)蛋白54抗體 RET原癌基因封閉多肽 人FAM172A蛋白(FAM172A)ELISA試劑盒

中期因子/肝結(jié)合生長因子抗體 鋅指蛋白711封閉多肽 人ES1蛋白同系物,線粒體(C21orf33/HES1/KNPI)試劑盒ELISA

腫瘤/睪丸抗原家族4亞型7抗體 轉(zhuǎn)錄因子Sp2封閉多肽 人Ephrin-B2(EFNB2)檢測試劑盒elisa
小鼠乳腺上皮細(xì)胞人原代神經(jīng)鞘膜瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:人原代神經(jīng)鞘膜瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

人胰腺腫瘤成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:人胰腺腫瘤成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基100ML

人胰腺腫瘤成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:人胰腺腫瘤成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基100ML

人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基100ML

大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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