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小鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 12:54:41瀏覽次數(shù):272

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 骨髓
小鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:A2058人黑色瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLA2058人黑色瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLA2780人卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLA2780人卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLA2780+GFP人卵巢癌+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨髓

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單個(gè)核細(xì)胞是骨髓中具有單個(gè)核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。注意這里是(mononuclear cell)單個(gè)核細(xì)胞,而不是(Monocyte)單核細(xì)胞。單個(gè)核細(xì)胞的體積、形態(tài)和比重與骨髓其他細(xì)胞不同,利用一定比例聚蔗糖和泛鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心,使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布,可將各種血細(xì)胞與單個(gè)核細(xì)胞分離。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用取骨髓、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái)制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)過(guò)檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  半貼壁半懸浮

細(xì)胞形態(tài)  圓形

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 白細(xì)胞介12p40封閉多肽 大鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒

谷氨受體調(diào)節(jié)蛋白2抗體 白細(xì)胞介28受體封閉多肽 大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)試劑盒ELISA

轉(zhuǎn)錄因子HES-1抗體 MGAT5B蛋白封閉多肽 大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA檢測(cè)試劑盒

膜相關(guān)環(huán)指蛋白7抗體 載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白封閉多肽 大鼠β羥丁(βOHB)elisa試劑盒

英文名稱: Histone H3 (Nuclear Loading Control) - 大鼠細(xì)胞色P450(CYP450)試劑盒elisa

磷酯Cβ2抗體 重組人附睪分泌蛋白4 大鼠生長(zhǎng)激釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)檢測(cè)試劑盒elisa

凋亡抑制因子IASPP抗體 20號(hào)染色體開放閱讀框100封閉多肽 大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒

葡萄糖氧化1抗體 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3封閉多肽 大鼠溴脫氧核苷(BrdU)試劑盒ELISA

絲裂原活化蛋白激1/2抗體 SERF1蛋白封閉多肽 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞間粘附分子-1(CD54)抗體 自噬效應(yīng)蛋白Beclin 1封閉多肽 大鼠細(xì)胞色P4502E1(CYP2E1)elisa試劑盒

蛋白質(zhì)磷2A-B55抗體 鋅指蛋白581封閉多肽 大鼠α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒elisa

周期依賴性激7抗體 原鈣粘蛋白7封閉多肽 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)檢測(cè)試劑盒elisa

英文名稱: JUNB 紫外切除修復(fù)蛋白R(shí)AD23B封閉多肽 大鼠過(guò)氧化物體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒

10號(hào)染色體開放閱讀框4抗體 4號(hào)染色體開放閱讀框29封閉多肽 大鼠鈣調(diào)(CAM)試劑盒ELISA

CD34抗體 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107封閉多肽 大鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA檢測(cè)試劑盒

組蛋白H2AX抗體 白細(xì)胞介-10受體β封閉多肽 大鼠網(wǎng)膜(omentin)elisa試劑盒

1號(hào)染色體開放閱讀框53抗體 ZCCHC2蛋白封閉多肽 大鼠孤腓肽(OFQ/N)試劑盒elisa

促腎上腺皮質(zhì)釋放激受體1抗體 EBV立即早期基因BRLF1封閉多肽  大鼠蛋白磷(PP)檢測(cè)試劑盒elisa
小鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞HS683人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HS683細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HS683人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HS683細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HS746T人胃癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HS746T細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HS746T人胃癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HS746T細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HSF(SV40)人真皮成纖維(原代永生化)細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HSF(SV40)細(xì)胞專用培養(yǎng)基100ML

HSF(SV40)人真皮成纖維(原代永生化)細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HSF(SV40)細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HT-1080人纖維肉瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HT-1080細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML


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