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人血管外膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

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更新時間:2023-04-26 15:26:14瀏覽次數(shù):357

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100mL/125mL×4
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 產(chǎn)品濃度
人血管外膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基的相關(guān)產(chǎn)品:MIA PaCa-2 (人胰腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) 大鼠原代真皮毛乳頭細(xì)胞人脈絡(luò)膜黑色細(xì)胞 大鼠原代支氣管平滑肌細(xì)胞兔肌腱成纖維細(xì)胞 大鼠原代支氣管上皮細(xì)胞AN3 CA (人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) 大鼠原代脂肪干細(xì)胞CTLA4 Ig-24 (中國倉鼠卵巢細(xì)胞)(種屬鑒定正確) 大鼠原代脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

產(chǎn)品形態(tài)

人血管外膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

100mL/125mL×4

液體

商品詳細(xì)介紹:

由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人血管外膜成纖維細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人血管外膜成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人血管外膜成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

產(chǎn)品說明

產(chǎn)品形態(tài):液體

產(chǎn)品濃度:1×

產(chǎn)品規(guī)格:100mL/125mL×4

細(xì)菌檢測:陰性

真菌檢測:陰性

支原體檢測:陰性

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn):細(xì)胞生長良好,形態(tài)正常

內(nèi)毒素含量(EU/mL):≤3

儲存條件:2~8℃,避光儲存

運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸

有效期:3個月

1.png

實(shí)驗(yàn)報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
公司產(chǎn)品僅用于科研

G6PC3 Antibody Blocking Peptide葡萄糖-6-磷3/G6Pase-β封閉多肽

G6PC Antibody Blocking Peptide葡萄糖6磷α/G6Pase-α封閉多肽

G6PC Antibody Blocking Peptide葡萄糖6磷α/G6Pase-α封閉多肽

GNPDA1 Antibody Blocking Peptide葡萄糖6-磷脫氨1封閉多肽

GNPDA2 Antibody Blocking Peptide葡萄糖6-磷脫氨2封閉多肽

G6PD Antibody Blocking Peptide葡萄糖-6磷脫氫封閉多肽

SLC37A4 Antibody Blocking Peptide葡萄糖-6磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白封閉多肽

PRKCSH Antibody Blocking Peptide葡萄糖苷2β/Glucosidase IIβ封閉多肽

GXYLT2 Antibody Blocking Peptide葡萄糖苷木糖基轉(zhuǎn)移2封閉多肽

GFOD2 Antibody Blocking Peptide葡萄糖果糖還原2封閉多肽

GYS1 Antibody Blocking Peptide葡萄糖合成1封閉多肽

GYS2 Antibody Blocking Peptide葡萄糖合成2封閉多肽

Human Zinc Finger, BED Type Containing Protein 3(ZBED3)ELISA Kit人含BED型鋅指蛋白3(ZBED3)ELISA試劑盒

Human Fibronectin Type III Domain Containing Protein 5(FNDC5)ELISA Kit人含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5(FNDC5)ELISA試劑盒

Human Trehalase(TREH)ELISA Kit人海藻糖(TREH)ELISA試劑盒

Human Hippocalcin(HPCA)ELISA Kit人海馬鈣蛋白(HPCA)ELISA試劑盒
人血管外膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基人骨髓造血干細(xì)胞 HFT-8810 (人胎兒胸腺細(xì)胞株)

人外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞 WI-38 (人胚肺細(xì)胞) (STR鑒定正確)

大鼠附睪上皮細(xì)胞 HBL-100 (人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞) (STR鑒定正確)

小鼠真皮成纖維細(xì)胞 Hep 3B2.1-7 (人肝癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)

魚脾淋巴細(xì)胞 SMMC-7721 (人肝癌細(xì)胞)


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