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大鼠滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:50:20瀏覽次數(shù):246

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 滑膜組織
大鼠滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:產(chǎn)品名稱:周期su依賴性激mei2(CDK2)重組蛋白英文名稱:Recombina Cyclin Depende Kinase 2 (CDK2)產(chǎn)品名稱:周期su依賴性激mei2(CDK2)重組蛋白英文名稱:Recombina Cyclin Depende Kinase 2 (CDK2)產(chǎn)品名稱:過氧化還原mei6(PRDX6)重組蛋白英文名稱:Recomb

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

滑膜組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自滑膜組織;滑膜組織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu),各種關(guān)節(jié)內(nèi)疾病均會(huì)累及滑膜。而滑膜細(xì)胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),同時(shí)在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關(guān)節(jié)炎(OA)以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣鳎洳±砀淖兝奂瓣P(guān)節(jié)的各個(gè)組成部分,但絕不僅局限于軟骨,還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響,相互作用,共同加速關(guān)節(jié)的退變?;ぜ?xì)胞是構(gòu)成滑膜層的大細(xì)胞群體,是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),它包埋在顆粒狀無定性的基質(zhì)中,基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布。滑膜由A型(巨噬樣滑膜細(xì)胞)、B型(成纖維樣滑膜細(xì)胞)以及C型(樹突細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞)細(xì)胞組成?;ぜ?xì)胞主要功能:①滑膜細(xì)胞產(chǎn)生潤滑液成分,并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關(guān);②滑膜細(xì)胞增生,表現(xiàn)為不依賴于支持物生長,并且分泌大量的效應(yīng)分子來促進(jìn)炎癥和關(guān)節(jié)損壞;③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法和低密度接種法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


  1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
  2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
  3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
  4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
  5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
  2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
  3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
  4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
  5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
  6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體 貓眼綜合征染色體候選基因1封閉多肽 豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA檢測(cè)試劑盒

WDR91蛋白抗體 敏感離子通道蛋白3封閉多肽 豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA Kit

線粒體融合蛋白Mfn2抗體 神經(jīng)組織特異性F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白2封閉多肽 豬細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒

PE標(biāo)記小鼠CD4單克隆抗體 早老蛋白-1封閉多肽 豬纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)試劑盒 ELISA

英文名稱: Gliadin 過氧化物HAO2封閉多肽 豬纖溶原激活物抑制因子(PAI)ELISA檢測(cè)試劑盒

24羥化抗體 鋅指蛋白843封閉多肽 豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA Kit

鋅指蛋白215抗體 絲裂原活化蛋白激激5封閉多肽 豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒

缺氧誘導(dǎo)蛋白HIG1抗體 BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白3封閉多肽 豬血小板衍生生長因子(PDGF)試劑盒 ELISA

相似腫瘤抑制基因HUGL抗體 磷化非受體酪氨激c-Abl封閉多肽 豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA檢測(cè)試劑盒

鋅指蛋白218抗體 宮頸癌原基因1/bri3結(jié)合蛋白封閉多肽 豬組織型纖溶原激活劑(t-PA)ELISA Kit

EXOSC8蛋白抗體?、蛐湍z原α1蛋白/軟骨鈣封閉多肽 豬組織因子(TF)ELISA試劑盒

胃腸道相關(guān)酪氨激/蛋白酪氨激5抗體 β3腎上腺能受體封閉多肽  豬白介1受體拮抗劑(IL1Ra) 試劑盒 ELISA

SH3YL1蛋白抗體 斯鈣2封閉多肽 豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA檢測(cè)試劑盒

肌間蛋白3抗體 鋅指蛋白3封閉多肽 豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA Kit

磷化蛋白酪氨激BAP135抗體 甘油二酯激κ/DGK-κ封閉多肽 豬低分子肝(LMWH)ELISA試劑盒

內(nèi)皮2抗體 核苷腺苷轉(zhuǎn)移3封閉多肽 豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌O((LLO)試劑盒 ELISA

黑色瘤相關(guān)抗原10抗體 堿性富含脯氨的淚蛋白封閉多肽 雞極低密度脂蛋白(VLDL) ELISA檢測(cè)試劑盒

組織相容性復(fù)合體蛋白1單克隆抗體 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白9復(fù)合體7b封閉多肽 雞轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)ELISA Kit
大鼠滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞原代少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL

原代星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系100mL

原代星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL

原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系100mL

原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL

原代星狀細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代星狀細(xì)胞培養(yǎng)體系100mL

原代星狀細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代星狀細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL



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