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人外周血單核細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:07:16瀏覽次數(shù):240

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 外周血
人外周血單核細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML小鼠腸間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML小鼠腸間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML人支氣管平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人外周血單核細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

外周血

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。單核細(xì)胞起源于骨髓中的造血干細(xì)胞,并在骨髓中發(fā)育。當(dāng)它們從骨髓進(jìn)入血液時(shí)仍然是尚未成熟的細(xì)胞。與其他血細(xì)胞比較,單核細(xì)胞內(nèi)含有更多的非特異性脂,并且具有更強(qiáng)的吞噬作用。單核細(xì)胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中,細(xì)胞體積繼續(xù)增大,直徑可達(dá)50-80μm,細(xì)胞內(nèi)所含的溶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多,成為成熟的細(xì)胞。固定在組織中的單核細(xì)胞稱為組織巨噬細(xì)胞,它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié)、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞能生成并釋放多種細(xì)胞毒、干擾素和白細(xì)胞介素,參與機(jī)體防衛(wèi)機(jī)制,還產(chǎn)生一些能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞生長的因子。在炎癥周圍單核細(xì)胞能進(jìn)行細(xì)胞分裂,并包圍異物。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  半貼壁半懸浮

細(xì)胞形態(tài)  圓形、巨噬細(xì)胞樣

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體 紅細(xì)胞膜蛋白STOM封閉多肽 小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA檢測試劑盒

囊泡谷氨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 妊娠特異性β1糖蛋白11封閉多肽 小鼠(AZT)ELISA Kit

甘精胰島單克隆抗體 原鈣粘附蛋白α1封閉多肽 小鼠β葡糖苷(β-glucosidase) ELISA試劑盒

α1-chimaerin蛋白抗體 轉(zhuǎn)錄因子同源蛋白NKX2.4封閉多肽 小鼠多巴胺(DA)試劑盒 ELISA

9號(hào)染色體開放閱讀框43抗體 6號(hào)染色體開放閱讀框204封閉多肽 小鼠高靈敏度促甲狀腺激(U-TSH)ELISA檢測試劑盒

染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1/染色體區(qū)域穩(wěn)定必需蛋白抗體 p60TRP蛋白封閉多肽 小鼠高敏甲狀腺(u-T4)ELISA Kit

電壓門控鉀通道蛋白KVβ.2抗體 腫瘤細(xì)胞調(diào)亡/死亡受體5封閉多肽 小鼠β葡萄糖醛苷(βGD) ELISA試劑盒

細(xì)胞色C氧化蛋白5B抗體 吲哚1封閉多肽 小鼠谷氨脫羧自身抗體(GAD-Ab)試劑盒 ELISA

脫氫激同功3抗體 甲型肝炎病毒細(xì)胞受體1封閉多肽 小鼠雌二醇受體(ER)ELISA檢測試劑盒

鋅指蛋白750抗體 Ras蛋白特異核苷釋放因子2封閉多肽 小鼠半乳糖6硫酯(Gal-6S) ELISA Kit

SCN2A抗體 肌漿/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP2封閉多肽 小鼠甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒

BarX1蛋白抗體 1號(hào)染色體開放閱讀框38封閉多肽 小鼠苯丙氨(LPA) 試劑盒 ELISA

補(bǔ)體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白6抗體 鈣粘蛋白相關(guān)神經(jīng)受體8封閉多肽 小鼠抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA檢測試劑盒

周期C抗體 2號(hào)染色體開放閱讀框53封閉多肽 小鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA Kit

Ki67蛋白抗體 T-激肽封閉多肽 小鼠抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒

環(huán)指蛋白109抗體 整聯(lián)蛋白重復(fù)蛋白2封閉多肽 小鼠apelin 12(AP12)試劑盒 ELISA

鋅指蛋白323抗體 蛋白脂質(zhì)蛋白2封閉多肽 小鼠α干擾(IFN-α)ELISA檢測試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體18抗體 eIF2Bδ蛋白封閉多肽 小鼠激(PK) ELISA Kit
人外周血單核細(xì)胞小鼠舌表皮細(xì)胞英文名稱:小鼠舌表皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠鼓膜上皮干細(xì)胞英文名稱:小鼠鼓膜上皮干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠鞏膜上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠鞏膜上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠視網(wǎng)膜mulller細(xì)胞英文名稱:小鼠視網(wǎng)膜mulller細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠牙齦成纖維細(xì)胞英文名稱:小鼠牙齦成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠結(jié)膜囊成纖維細(xì)胞英文名稱:小鼠結(jié)膜囊成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

 


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