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人退行性椎間盤髓核細胞

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更新時間:2023-04-21 15:06:39瀏覽次數(shù):276

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 椎間盤組織
人退行性椎間盤髓核細胞的相關產(chǎn)品:小鼠肺動脈平滑肌細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基100ML小鼠肺動脈平滑肌細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500ML小鼠卵巢顆粒細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基100ML小鼠卵巢顆粒細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500ML小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基100ML

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

人退行性椎間盤髓核細胞分離退行性椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,分為中央部的髓核,富于彈性的膠狀物質(zhì);周圍部的纖維環(huán),由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板,是透明軟骨復蓋于椎體上,下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅實的組織,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負荷。髓核,是乳白色半透明膠狀體,富于彈性,為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分,位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時期的髓核含水量為80%-90%,即使到了老年,其含水量也在70%上下。髓核在出生時體積大而松散,位于椎間盤的中央,至成年時位置移至椎間盤的中后部;在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復合體、膠原纖維和纖維軟骨,隨著年齡的增長,髓核中的蛋白多糖解聚增多,水分逐漸減少,膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法并結(jié)合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    3-4天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人退行性椎間盤髓核細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

椎間盤組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

連接蛋白3抗體 細胞表面趨化因子受體5封閉多肽 小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA檢測試劑盒

7號染色體開放閱讀框46抗體 鋅指蛋白801封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF) ELISA Kit

干擾誘導的雙鏈RNA活化蛋白激單克隆抗體 FBXL12蛋白封閉多肽 小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒

中腦核仁蛋白抗體 5號染色體開放閱讀框36封閉多肽 小鼠髓過氧化物(MPO)試劑盒 ELISA

甲狀腺激轉(zhuǎn)運蛋白/單羧轉(zhuǎn)運蛋白7/8抗體 FAM162B蛋白封閉多肽 小鼠顆粒B(Gzms-B)ELISA檢測試劑盒

AF750標記小鼠抗人CD34單克隆抗體 SPRED2蛋白封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA Kit

長鏈脂肪延長長ELOVL5抗體 19號染色體開放閱讀框44封閉多肽 小鼠顆粒A(Gzms-A)ELISA試劑盒

過氧化物8抗體 5-羥色胺受體1A封閉多肽 小鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)試劑盒 ELISA

DTX1抗體 腎細胞癌下調(diào)蛋白1封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA檢測試劑盒

血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體 Bax封閉多肽 小鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA Kit

組織C抗體 溶質(zhì)載體家族25成員42封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒

神經(jīng)內(nèi)分泌特異性蛋白2抗體 血小板源性生長因子A相關蛋白2封閉多肽 小鼠補體蛋白4(C4)試劑盒 ELISA

G蛋白偶聯(lián)受體C5B抗體 原鈣粘蛋白γA1封閉多肽 小鼠腎(Renin)ELISA檢測試劑盒

S轉(zhuǎn)移A3抗體 視神經(jīng)細胞相關蛋白/早老結(jié)合蛋白封閉多肽 小鼠α2抗纖溶(α2-AP)ELISA Kit

磷脂DDHD1抗體 表皮細胞表面抗原1/Esa1封閉多肽 小鼠α2纖溶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒

DNA甲基轉(zhuǎn)移1抗體 睪丸蛋白聚糖2封閉多肽 小鼠泛蛋白(Ub)試劑盒 ELISA

轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體 線粒體蘋果脫氫2封閉多肽 小鼠αL艾杜糖苷(IDUA)ELISA檢測試劑盒

骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I抗體 溶質(zhì)載體家族蛋白35成員D2封閉多肽 小鼠αN已酰氨基葡糖苷(αNAG)ELISA Kit
人退行性椎間盤髓核細胞小鼠杏仁核神經(jīng)元細胞英文名稱:小鼠杏仁核神經(jīng)元細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠角膜上皮細胞英文名稱:小鼠角膜上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠角膜基質(zhì)細胞英文名稱:小鼠角膜基質(zhì)細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠視網(wǎng)膜色上皮細胞 英文名稱:小鼠視網(wǎng)膜色上皮細胞 5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠晶狀體上皮細胞英文名稱:小鼠晶狀體上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠結(jié)膜成纖維細胞英文名稱:小鼠結(jié)膜成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠結(jié)膜上皮細胞英文名稱:小鼠結(jié)膜上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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