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小鼠浦肯野細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 12:53:53瀏覽次數(shù):347

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 小腦組織
小鼠浦肯野細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:769-P人腎腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML769-P人腎腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML786-O[786-0]人腎透明腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML786-O[786-0]人腎透明腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML95-D人高轉(zhuǎn)移肺癌 細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自小腦皮質(zhì)組織;小腦的表面被覆著一層灰質(zhì),叫小腦皮質(zhì),小腦皮質(zhì)分為3層,從表及里分別為分子層、浦肯野細(xì)胞層和顆粒細(xì)胞層。皮質(zhì)里含有星狀細(xì)胞、籃狀細(xì)胞、浦肯野細(xì)胞、高爾基細(xì)胞和顆粒細(xì)胞等5種神經(jīng)元。浦肯野細(xì)胞發(fā)出的軸突組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維,終止于小腦白質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)核。浦肯野細(xì)胞(Purkinje cell)是從小腦皮質(zhì)發(fā)出的能夠傳出沖動(dòng)的神經(jīng)元。人的小腦皮質(zhì)約有1500萬(wàn)個(gè)浦肯野細(xì)胞。浦肯野細(xì)胞還廣泛分布于心室。顯著的電生理特點(diǎn)是傳導(dǎo)性強(qiáng),傳導(dǎo)速度快,可達(dá)4000mm/s。屬快反應(yīng)自律型細(xì)胞,具有舒張期自動(dòng)除極化的性能,因而有自律性,但自律性強(qiáng)度明顯低于竇房結(jié)P細(xì)胞。這類細(xì)胞常常平行排列,細(xì)胞內(nèi)電阻低,只有心室細(xì)胞的1/3。小腦:浦肯野細(xì)胞是小腦皮質(zhì)中大的神經(jīng)元,細(xì)胞體呈梨形,頂端發(fā)出2~3條粗大的主樹突,向外伸入分子層。主樹突沿途分支繁茂,形如展開的、扁薄的扇形,鋪展在與小腦葉片長(zhǎng)軸垂直的平面上。樹突分支上有大量的樹突棘,與傳入纖維構(gòu)成廣泛的突觸聯(lián)系,接受傳入小腦的全部信息。軸突由細(xì)胞底部(與主樹突相對(duì)方向)發(fā)出,細(xì)長(zhǎng),離開胞體不遠(yuǎn)便形成有髓神經(jīng)纖維,向內(nèi)經(jīng)顆粒層離開皮質(zhì)進(jìn)入白質(zhì),組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維,終止于小腦內(nèi)部的神經(jīng)核團(tuán)。一個(gè)浦肯野細(xì)胞的軸突約形成500個(gè)終末膨大,約與小腦深部核團(tuán)的35個(gè)神經(jīng)元形成突觸。心臟浦肯野細(xì)胞常常平行排列,幾個(gè)細(xì)胞互相以漿膜連接排成一個(gè)小束,小束外包繞著基底膜。細(xì)胞內(nèi)含肌原纖維很少,胞漿區(qū)內(nèi)充滿糖原顆粒、線粒體和肌漿網(wǎng),細(xì)胞內(nèi)電阻低,只有心室細(xì)胞的1/3。浦肯野細(xì)胞內(nèi)無(wú)橫管系統(tǒng),但膜電容比收縮細(xì)胞大,可能是由于其閏盤結(jié)構(gòu)廣泛而復(fù)雜,提供了較大的表面積的緣故。浦肯野細(xì)胞閏盤的主要成分是縫隙連接,粒著膜占的比例很少,這些可能是構(gòu)成浦肯野細(xì)胞傳導(dǎo)快的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Neph3免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  含脂質(zhì)濃縮液、BSA、Monothioglycerol、Transferrin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠浦肯野細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

小腦組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

脫氫E2抗體 CD83封閉多肽 大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒

肝腸鈣粘連蛋白抗體 重組人CD3E蛋白 大鼠乙醇脫氫(ADH)試劑盒ELISA

無(wú)腦回的致病基因LIS1抗體 神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3前蛋白封閉多肽 大鼠乙醛脫氫(ALDH)ELISA檢測(cè)試劑盒

生長(zhǎng)抑抗體 Kelch樣蛋白36封閉多肽 大鼠可溶性CD14(sCD14)elisa試劑盒

干擾epsilon 1蛋白抗體 泛D封閉多肽 大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激(MIS/AMH)試劑盒elisa

磺酰脲類藥物受體1抗體 共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣1封閉多肽 大鼠雄激(androgen)檢測(cè)試劑盒elisa

白介22受體結(jié)合蛋白抗體 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G3PP封閉多肽 大鼠Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒

性線粒體肌激抗體 鋅指蛋白583封閉多肽 大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)試劑盒ELISA

MAP3K13蛋白抗體 干擾相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)因子2封閉多肽 大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA檢測(cè)試劑盒

乙?;M蛋白H2B (Lys24)鼠單克隆抗體 三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5封閉多肽 大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)elisa試劑盒

英文名稱: CD23 GATA結(jié)合蛋白6封閉多肽 大鼠CD44分子(CD44)試劑盒elisa

蛋白磷γ1抗體 精氨結(jié)合蛋白2封閉多肽 大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)檢測(cè)試劑盒elisa

磷化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體 磷化蛋白激AKT1,2,3封閉多肽 大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒

造血干細(xì)胞抗原CD133抗體 RAN結(jié)合蛋白1封閉多肽 大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒ELISA

白介-1受體相關(guān)激4抗體 富含亮氨重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白6封閉多肽 大鼠胰島自身抗體(IAA)ELISA檢測(cè)試劑盒

多發(fā)性肌炎/硬皮病自身抗原2抗體 磷化P21蛋白激活的蛋白激6封閉多肽 大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)elisa試劑盒

轉(zhuǎn)錄因子THOC2抗體 雙特異性蛋白磷5封閉多肽 大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)試劑盒elisa

磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體 嗜粒細(xì)胞趨化蛋白22封閉多肽 大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)檢測(cè)試劑盒elisa
小鼠浦肯野細(xì)胞HMEC-1人微血管內(nèi)皮株細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HMEC-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基100ML

HMEC-1人微血管內(nèi)皮株細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HMEC-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HO-8910PM人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HO-8910PM細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HO-8910PM人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HO-8910PM細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HOS人骨肉瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HOS細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HOS人骨肉瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HOS細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HPAC人胰腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HPAC細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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