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人骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:46:02瀏覽次數(shù):275

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 骨骼肌組織
人骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠肺微血管周細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠心肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠心房心肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠心室心肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠心肌成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨骼肌組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細(xì)胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng)。微血管又稱毛細(xì)血管。分布于各種組織和細(xì)胞間的微細(xì)的血管。介于微動(dòng)脈和微靜脈之間。平均直徑7~9微米,數(shù)量極多,成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細(xì)胞及一薄層基膜組成,厚約0.5微米?;ね饷嬗斜咏Y(jié)締組織,其中有纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和周細(xì)胞等。細(xì)的微血管由一個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成管腔,較粗的微血管由2~3個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成。分布于肌肉組織、神經(jīng)組織和結(jié)締組織中的微血管,內(nèi)皮細(xì)胞間為縫隙連接(縫隙寬150埃),稱連續(xù)微血管。血管內(nèi)皮細(xì)胞在器官和組織的結(jié)構(gòu)和功能上起著非常重要的作用。并與多種疾病的發(fā)生與發(fā)展有關(guān)。近年來血管內(nèi)皮細(xì)胞在炎癥、休克等一系列病理生理改變中的重要性愈來愈受到人們的重視。研究發(fā)現(xiàn),不同來源的內(nèi)皮細(xì)胞在生物學(xué)特征、結(jié)構(gòu)和功能等方面均存在一定差別,而同是微血管內(nèi)皮細(xì)胞,它們又存在器官和組織的特異性。骨骼肌組織是動(dòng)物體內(nèi)含量多的組織,肌肉組織供血豐富,是研究內(nèi)皮細(xì)胞功能和血管生成的理想靶組織。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化結(jié)合差速貼壁法、專用培養(yǎng)基篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

1號染色體開放閱讀框50抗體 膜相關(guān)環(huán)指蛋白2封閉多肽 豬骨鈣/骨谷氨蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒

EFHD1蛋白單克隆抗體 肌球蛋白15封閉多肽 豬腎上腺(EPI)試劑盒 ELISA

交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體 羰基還原1封閉多肽 豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA檢測試劑盒

EGR1結(jié)合蛋白2抗體 腺苷環(huán)化激活肽受體-II/血管活性腸肽受體-II封閉多肽 豬促甲狀腺釋放激(TRH)ELISA Kit

富含亮氨重復(fù)蛋白15抗體 鈣磷蛋白2封閉多肽 豬抗受體(ATR)ELISA試劑盒

肽基脯氨酞順反異構(gòu)Pinl抗體 HILS1蛋白封閉多肽 豬組胺(HIS)試劑盒 ELISA

G蛋白偶聯(lián)受體MRGX3抗體 白細(xì)胞介6受體α/IL-6Rα封閉多肽 豬雌二醇(E2)ELISA檢測試劑盒

磷化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體 蛋白酪氨磷2封閉多肽 豬轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA Kit

英文名稱: STAT4 9號染色體開放閱讀框114封閉多肽 豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒

載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物3C抗體 同源轉(zhuǎn)錄因子DLX1封閉多肽 豬脂聯(lián)(ADP)試劑盒 ELISA

丘腦分泌受體2抗體 擬南芥果膠多肽 豬載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA檢測試劑盒

微小細(xì)胞血癥相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子單克隆抗體 甘油二酯激η/DGK-η封閉多肽 豬載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA Kit

核糖體S6蛋白激β2抗體 腦組織表達(dá)X連鎖蛋白1封閉多肽 豬胰島樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒

白介6抗體 絲氨/蘇氨蛋白激PIM3封閉多肽 豬胰島樣生長因子2(IGF-2)試劑盒 ELISA

小腦鋅指ZIC4蛋白抗體 脊髓灰質(zhì)炎病毒受體相關(guān)蛋白4封閉多肽 豬胰島樣生長因子1(IGF-1)ELISA檢測試劑盒

層粘蛋白α1抗體 組蛋白去乙?;瘡?fù)合亞基SAP30封閉多肽 豬胰島(INS)ELISA Kit

DPH3蛋白抗體 磷化β分泌封閉多肽 豬血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒

血小板源性生長因子受體A/PDGFRα抗體 MAGIX蛋白封閉多肽 豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒 ELISA
人骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代肌腱細(xì)胞添加劑英文名稱:原代肌腱細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代淋巴細(xì)胞添加劑英文名稱:原代淋巴細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代卵泡膜細(xì)胞添加劑英文名稱:原代卵泡膜細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代支持細(xì)胞添加劑英文名稱:原代支持細(xì)胞添加劑5mL(100X)

H9細(xì)胞消化液(相關(guān)1)英文名稱:H9細(xì)胞消化液(相關(guān)1)100mL

H9細(xì)胞消化液(相關(guān)1)英文名稱:H9細(xì)胞消化液(相關(guān)1)500mL

H1細(xì)胞消化液(相關(guān)1)英文名稱:H1細(xì)胞消化液(相關(guān)1)100mL

 


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