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大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 10:58:43瀏覽次數(shù):248

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 小腸組織
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:CEM/C1人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞人細(xì)胞系1×106CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106CoC1人卵巢癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106COLO205人結(jié)腸癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106COLO320人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

小腸組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,因?yàn)槭澄锝?jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動(dòng)的機(jī)械性消化后,基本上完成了消化過程,同時(shí)營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運(yùn)動(dòng)功能,其中以吸收和分泌功能為主。小腸腔面的環(huán)行皺襞從幽門附近開始出現(xiàn),在十二指腸末段和空腸頭段極發(fā)達(dá),向下逐漸減少和變矮,至腸中段以下基本消失。粘膜表面還有許多細(xì)小的腸絨毛,是由上皮和固有層向腸腔突起而成,形狀不一,以十二指腸和空腸頭段發(fā)達(dá)。絨毛于十二指腸呈葉狀,于空腸呈指狀,于回腸則細(xì)而短。環(huán)行皺襞和絨毛使小腸表面積擴(kuò)大20-30倍,絨毛根部的上皮下隱至固有層形成管狀的小腸腺,又稱腸隱窩,故小腸腺與絨毛的上皮是連續(xù)的,小腸腺直接開口于腸腔。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用先機(jī)械分離法、后膠原消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人絨毛膜促性腺激β亞基/β-HCG單克隆抗體 煙堿型乙酰受體α7封閉多肽 人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒

原癌基因蛋白c-kit(CD117)抗體 丁鹽反應(yīng)因子1封閉多肽 人細(xì)胞角蛋白13(CK-13)試劑盒ELISA

ELMO3蛋白抗體 腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體封閉多肽 人細(xì)胞角蛋白17(CK17)ELISA檢測(cè)試劑盒

核呼吸因子-1重組鼠單克隆抗體 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體α封閉多肽 人制瘤M受體(OSMR)elisa試劑盒

S2P內(nèi)肽抗體 KIAA1712蛋白封閉多肽 人B細(xì)胞淋巴瘤因子3(Bcl3)試劑盒elisa

CREB結(jié)合蛋白抗體 鉀離子通道蛋白12封閉多肽 人癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)檢測(cè)試劑盒elisa

GTP結(jié)合蛋白10抗體 3-氨基-2-惡唑烷酮牛血清白蛋白偶聯(lián)物 人P27蛋白(P27)ELISA試劑盒

H2-Q10蛋白多克隆抗體 LRRC41蛋白封閉多肽 人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)試劑盒ELISA

細(xì)胞外基質(zhì)金屬誘導(dǎo)因子抗體 細(xì)胞色P450 7A1封閉多肽/7a羥化封閉多肽 人大腸癌專一抗原3(CCSA-3)ELISA檢測(cè)試劑盒

Smad蛋白相互作用蛋白1抗體 FLIP封閉多肽 人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)elisa試劑盒

自噬效應(yīng)蛋白Beclin 1單克隆抗體 絲氨/蘇氨蛋白磷3B封閉多肽 人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)試劑盒elisa

EMT標(biāo)志物抗體套裝 磷化雌激受體α封閉多肽 人粘蛋白/粘液5B(MUC5B)檢測(cè)試劑盒elisa

腦肌激BCK抗體 β-內(nèi)啡肽/β endorphin封閉多肽 人腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒

葡萄糖6-磷脫氨2抗體 溶質(zhì)載體家族22成員18樣蛋白封閉多肽 人Dickkopf1(DKK1)試劑盒ELISA

磷化蛋白激B抗體 干擾alpha 14蛋白封閉多肽 人激肽釋放11(KLK11)ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白2抗體 神經(jīng)突觸1封閉多肽 人生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑瘤生長刺激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)elisa試劑盒

英文名稱: CD134 磷化FANCD2封閉多肽 人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑瘤生長刺激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)試劑盒elisa

磷化原癌基因蛋白c-kit抗體 1號(hào)染色體開放閱讀框125封閉多肽 人美麗線蟲凋亡基因(CED-3)檢測(cè)試劑盒elisa
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞ES-2人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞英文名稱:ES-21×106McCOY's 5A +10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

F56人腺癌細(xì)胞系英文名稱:F561×106DMEM+10%FBS+1%P/S提供STR鑒定報(bào)告

FADu 人咽鱗癌細(xì)胞英文名稱:FADu 1×106MEM+10%FBS+1%PS提供STR鑒定報(bào)告

FTC-133人甲狀腺癌細(xì)胞英文名稱:FTC-1331×1061640+10%FBS +1%P/S提供STR鑒定報(bào)告

GBC-SD 人膽囊癌細(xì)胞英文名稱:GBC-SD1×1061640+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

GBC-SD+LUC 人膽囊癌細(xì)胞熒光標(biāo)記英文名稱:GBC-SD+LUC1×1061640+10%FBS+1%P/S 提供GBC-SD細(xì)胞鑒定報(bào)告

GES-1人胃黏膜上皮細(xì)胞英文名稱:GES-11×1061640+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

 


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