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小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:05:55瀏覽次數(shù):269

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 肺組織
小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML人脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML大鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML大鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML雞骨骼肌細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肺組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自肺組織;肺是機(jī)體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱(chēng)喉為肺之門(mén)戶(hù),鼻為肺之外竅。微血管內(nèi)皮細(xì)胞密切參與包括再生、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應(yīng)。細(xì)胞呈梭形或多角形,形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成半選擇性屏障,該屏障對(duì)于肺氣體交換,調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動(dòng)具有重要意義。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用組織貼塊法并結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

免疫球蛋白λ輕鏈恒定區(qū)1抗體 腦蛋白44封閉多肽 小鼠己糖激(HK)ELISA檢測(cè)試劑盒

紅細(xì)胞膜條帶4.1蛋白抗體 胰島受體底物-4封閉多肽 小鼠脫氫E1(PDH E1) ELISA Kit

組蛋白H2B抗體 環(huán)指蛋白89 小鼠糖原合成激(GSK)ELISA試劑盒

高爾基體自身蛋白8J抗體 TRIM72蛋白封閉多肽 小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)試劑盒 ELISA

線(xiàn)粒體甘油3磷?;D(zhuǎn)移抗體 鋅指蛋白3/環(huán)指蛋白3封閉多肽 小鼠高敏三碘甲狀腺原氨(u-T3)ELISA檢測(cè)試劑盒

SCRN3蛋白抗體 B淋巴細(xì)胞淋巴瘤因子9封閉多肽 小鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA Kit

英文名稱(chēng): HIF-2 alpha 中心體蛋白78封閉多肽  小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框57抗體 重組人CD2蛋白 小鼠腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)試劑盒 ELISA

5色氨羥化2抗體 NCK銜接蛋白1封閉多肽 小鼠羥脯氨(Hyp)ELISA檢測(cè)試劑盒

神經(jīng)生長(zhǎng)因子調(diào)控抑制蛋白抗體 磷化酪蛋白激Ⅱβ亞單位封閉多肽 小鼠骨保護(hù)配體(OPGL)ELISA Kit

甘油吸收/轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白GUP1抗體 信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白SIRPD封閉多肽 小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒

英文名稱(chēng): phospho-Tau (Thr231) 甲基化組蛋白H3 (tri methyl K36) 封閉多肽 小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)試劑盒 ELISA

轉(zhuǎn)導(dǎo)樣增強(qiáng)蛋白1小鼠單克隆抗體 磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B封閉多肽 小鼠鐵蛋白(FE)ELISA檢測(cè)試劑盒

鋅指蛋白653抗體 β鏈接相互作用蛋白1封閉多肽 小鼠碳酐2(CA-2)ELISA Kit

英文名稱(chēng): Phospho-Smad3 (Ser423 + Ser425) 重組人血管緊張轉(zhuǎn)換2 小鼠色上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒

心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體 Alexa Fluor 750標(biāo)記鏈霉親和 小鼠解整合樣金屬8(ADAM8)試劑盒 ELISA

磷化蛋白磷2C亞型α抗體 雌二醇雞卵白蛋白偶聯(lián)物 小鼠抗胰(AT)ELISA檢測(cè)試劑盒

白喉毒B抗體 甲型流感病毒血凝封閉多肽 小鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA Kit
小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞小鼠腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞英文名稱(chēng):小鼠腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠神經(jīng)干細(xì)胞英文名稱(chēng):小鼠神經(jīng)干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠腦血管成纖維細(xì)胞英文名稱(chēng):小鼠腦血管成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠DRG神經(jīng)元細(xì)胞英文名稱(chēng):小鼠DRG神經(jīng)元細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞英文名稱(chēng):小鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞英文名稱(chēng):小鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞英文名稱(chēng):小鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告


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