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小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 12:45:29瀏覽次數(shù):281

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 肺動(dòng)脈組織
小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠乳腺成纖維細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×1065637人膀胱癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML5637人膀胱癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML8305C人甲狀腺癌8305C(未分化)細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML8305C人甲狀腺癌8305C(未分化)細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肺動(dòng)脈組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自肺大動(dòng)脈組織;肺大動(dòng)脈亦稱肺動(dòng)脈干。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動(dòng)脈。肺大動(dòng)脈起于右心室,在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行,在主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈,經(jīng)肺門(mén)入肺。肺動(dòng)脈干位于心包內(nèi),為一粗短的動(dòng)脈干。起自右心室,在升主動(dòng)脈前方向左后上方斜行,至主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈。左肺動(dòng)脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進(jìn)入左肺上、下葉。右肺動(dòng)脈較長(zhǎng)而粗,經(jīng)升主動(dòng)脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門(mén)處分為三支進(jìn)入右肺上、中、下葉。細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布;該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布,該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白-膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

G蛋白偶聯(lián)受體TAS1R3抗體 磷化微管相關(guān)蛋白封閉多肽 大鼠抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAGAb)ELISA試劑盒

神經(jīng)細(xì)胞增殖和分化調(diào)控蛋白1抗體 抑癌基因封閉多肽 大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)試劑盒ELISA

自噬相關(guān)蛋白16A抗體 乳腺癌膜相關(guān)蛋白101封閉多肽 大鼠磷化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞角蛋白16單克隆抗體 環(huán)指蛋白16封閉多肽 大鼠核因子κB(NF-κB)elisa試劑盒

富含亮氨重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 Hsp90輔助伴侶分子CDC37封閉多肽 大鼠樹(shù)突狀細(xì)胞表面特異性C型凝集-細(xì)胞間黏附分子3結(jié)合非整合分子(DC-SIGN/CD209)試劑盒elisa

膽囊收縮39抗體 β淀粉樣肽(25-35)多肽 大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)檢測(cè)試劑盒elisa

雷帕霉靶蛋白抗體 環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲(chóng))封閉多肽 大鼠解整合樣金屬9(ADAM9)ELISA試劑盒

核纖層蛋白B受體抗體 CD70封閉多肽 大鼠c-fos試劑盒ELISA

凋亡研究抗體套裝 鋅指蛋白92封閉多肽 大鼠c-junELISA檢測(cè)試劑盒

RET原癌基因抗體 肌醇加氧封閉多肽 大鼠可溶性白介6受體(sIL-6R)elisa試劑盒

磷化絲裂原活化蛋白激MKK3/6抗體 磷化磷脂酰肌醇激p85β封閉多肽 大鼠吡啶酚(PYD)試劑盒elisa

間隙連接蛋白29/GJE1抗體 視桿細(xì)胞相關(guān)蛋白MREG封閉多肽 大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解2(BACE2)檢測(cè)試劑盒elisa

磷化二氫嘧啶樣2(CRMP2/DPYL2)抗體 胰高血糖封閉多肽 大鼠骨堿性磷(BALP)ELISA試劑盒

SH3D19抗體 血管粘附蛋白1多肽 大鼠凝聚(CLU)試劑盒ELISA

胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 雌激調(diào)節(jié)基因1封閉多肽 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA檢測(cè)試劑盒

β淀粉樣肽/Aβ42抗體 γ-內(nèi)啡肽封閉多肽 大鼠白介32(IL-32)elisa試劑盒

細(xì)胞角蛋白18抗體(C端) 脂質(zhì)磷磷相關(guān)蛋白2封閉多肽 大鼠孕酮受體(PROGR)試劑盒elisa

谷氧還蛋白2抗體 鋅指蛋白92封閉多肽 大鼠白介21(IL-21)檢測(cè)試劑盒elisa
小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞HEY人卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HEY細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HEY人卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HEY細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HEY A8人卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HEY A8細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HEY A8人卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HEY A8細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HFL1人肺成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HFL1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HFL1人肺成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HFL1細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HFF-1人皮膚成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HFF-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML


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