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小鼠骨骼肌成纖維細胞

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更新時間:2023-04-23 10:22:33瀏覽次數(shù):267

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨骼肌組織
小鼠骨骼肌成纖維細胞的相關產(chǎn)品:SW480 [SW-480] (人結腸癌細胞) (DMEM) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶MDA-MB-435S (人乳腺癌細胞/人黑瘤細胞) (M14污染細胞系,)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠腸黏膜上皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶SCC-25 [SCC 25; SCC25] (人舌鱗癌細胞)(STR鑒定正確)1×10?c

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結構和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌成纖維細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方。骨骼肌間質中有很多成纖維細胞。成纖維細胞是結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳1-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠骨骼肌成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

骨骼肌組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

骨形態(tài)發(fā)生抑制蛋白SOST抗體 Crk p38封閉多肽  

細胞色C氧化蛋白7B2抗體 重組小鼠嗜鉻粒A蛋白 

ANKLE2蛋白抗體 突觸結合蛋白1樣2封閉多肽 

乳鐵蛋白單克隆抗體 剪接體相關蛋白62封閉多肽 

ZRANB3蛋白抗體 磷化絲氨/蘇氨蛋白激MARK3封閉多肽 

視網(wǎng)膜鈉/鉀/鈣交換體2抗體 磷化DNA依賴性蛋白激封閉多肽 

磷化p21蛋白抗體 磷化活化復制因子2封閉多肽 

膽汁結合蛋白DDH2抗體 精氨2封閉多肽 

英文名稱: SARS-CoV-2 Spike Protein S1 RAB3-GTP激活蛋白催化亞單位1封閉多肽 

結腸癌抗原16抗體 突觸結合蛋白12封閉多肽 

羅伯茨綜合征相關蛋白抗體 磷化轉化生長因子β活化激1封閉多肽 

CD307d蛋白抗體 肝癌衍生生長因子2封閉多肽 

轉錄因子Tbx3抗體 非霍奇金淋巴瘤重復蛋白2封閉多肽 

磷脂C樣蛋白2抗體 自噬微管相關蛋白輕鏈3A/3B封閉多肽 

葡萄糖轉運蛋白3抗體 穿孔封閉多肽 

泛激4抗體 富含亮氨重復結構域蛋白7封閉多肽 

20號染色體開放閱讀框7抗體 溶質載體家族25成員19封閉多肽 

包含氧化還原的WW域抗體 粘附分子IgG樣結構域蛋白1封閉多肽 
小鼠骨骼肌成纖維細胞HBE細胞專用培養(yǎng)基125mL×4HBE細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HBE細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HBE細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HBE細胞的體外培養(yǎng)。

大鼠氣管平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL大鼠氣管平滑肌細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠氣管平滑肌細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠氣管平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠氣管平滑肌細胞的體外培養(yǎng)。

小鼠牙齦成纖維細胞培養(yǎng)基100mL小鼠牙齦成纖維細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠牙齦成纖維細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠牙齦成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠牙齦成纖維細胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

大鼠子宮成纖維細胞培養(yǎng)基100mL大鼠子宮成纖維細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠子宮成纖維細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠子宮成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠子宮成纖維細胞的體外培養(yǎng)。

MLO-Y4 [MLOY4]細胞專用培養(yǎng)基125mL×4MLO-Y4 [MLOY4]細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MLO-Y4 [MLOY4]細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MLO-Y4 [MLOY4]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MLO-Y4 [MLOY4]細胞的體外培養(yǎng)。

J82細胞專用培養(yǎng)基125mL×4J82細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持J82細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含J82細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于J82細胞的體外培養(yǎng)。

H-4-II-E [H4-II-E]細胞專用培養(yǎng)基125mL×4H-4-II-E [H4-II-E]細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持H-4-II-E [H4-II-E]細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含H-4-II-E [H4-II-E]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于H-4-II-E [H4-II-E]細胞的體外培養(yǎng)。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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