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大鼠肺血管平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-23 10:23:33瀏覽次數(shù):226

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肺組織
大鼠肺血管平滑肌細胞的相關(guān)產(chǎn)品:人臍帶血造血干細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶人子宮平滑肌細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠前列腺上皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠牙齦成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠真皮微血管內(nèi)皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠肺血管平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

肺組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。肺血管平滑肌細胞主要功能:①細胞表面表達介質(zhì)(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng);②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細胞。肺血管平滑肌細胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關(guān)鍵因素,新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應(yīng),并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關(guān)。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

泛結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 FAM98C蛋白封閉多肽 

突觸小泡蛋白樣蛋白1抗體 細胞外信號調(diào)節(jié)激5封閉多肽 

酪蛋白激1γ2抗體 吸引封閉多肽 

FAM101B蛋白抗體 碳氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A4突變型封閉多肽 

白介-22抗體 性鈣調(diào)蛋白3封閉多肽 

RAB6蛋白抗體 卵黃狀黃斑病蛋白4封閉多肽 

PYROXD2蛋白抗體 環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白封閉多肽 

范可尼貧血組蛋白A抗體 凋亡相關(guān)蛋白激3封閉多肽 

亮氨拉鏈樣轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子1抗體 Runx3封閉多肽 

產(chǎn)氣莢膜梭菌(魏氏梭菌)磷脂C抗體 鉀電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員7封閉多肽 

嘌呤元結(jié)合蛋白G抗體 人類乳頭狀瘤病毒18 E6封閉多肽 

磷化甲狀腺受體相關(guān)蛋白220抗體 FOXJ3蛋白封閉多肽 

磷化整合β3/CD61抗體 叉頭蛋白O1/O3/O4封閉多肽 

角蛋白相關(guān)蛋白11-1抗體 P73腫瘤抑制基因封閉多肽 

硫辛酰連接抗體 磷羧化2封閉多肽 

連接粘附分子C抗體 四連接同源蛋白FJX1封閉多肽 

英文名稱: Beta Actin (CAEEL,Loading Control) 核黃轉(zhuǎn)運蛋白2封閉多肽 

G蛋白結(jié)合蛋白7抗體 磷化ZCWCC1封閉多肽 
大鼠肺血管平滑肌細胞R 1610細胞專用培養(yǎng)基125mL×4R 1610細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持R 1610細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含R 1610細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于R 1610細胞的體外培養(yǎng)。

T98G細胞專用培養(yǎng)基125mL×4T98G細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持T98G細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含T98G細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于T98G細胞的體外培養(yǎng)。

HFSF細胞專用培養(yǎng)基125mL×4HFSF細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HFSF細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HFSF細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HFSF細胞的體外培養(yǎng)。

DMEM無糖(不含鈉)500mL-

DMEM高糖(不含L-,含雙抗)500mL-

兔腸動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL兔腸動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔腸動脈內(nèi)皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含兔腸動脈內(nèi)皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔腸動脈內(nèi)皮細胞的體外培養(yǎng)。

MRC-5細胞專用培養(yǎng)基125mL×4MRC-5細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MRC-5細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MRC-5細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MRC-5細胞的體外培養(yǎng)。


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