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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 組織來源 | 外周血 |
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 組織來源 |
大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞) | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 外周血 |
商品詳細(xì)介紹：
4.細(xì)胞簡介：
分離自外周血，由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未成熟樹突狀細(xì)胞，典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落，細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則，表面皺褶多，亦可見少量短刺狀突，胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡，具有較強(qiáng)的遷移能力，伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞，貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成，多數(shù)呈懸浮生長， 細(xì)胞呈圓形，細(xì)胞體積進(jìn)一步增大，表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 )，伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞。未成熟DC細(xì)胞長時(shí)間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細(xì)胞尚無特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志，主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進(jìn)行鑒定。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子，進(jìn)而激活T淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)免疫應(yīng)答，處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)；未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強(qiáng)的抗原攝取加工能力，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答，不能激活T細(xì)胞的第二信號(hào)，可導(dǎo)致T細(xì)胞無能，從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細(xì)胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低，一般在30%以下。
5.方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的采用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測：
實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細(xì) 胞 形態(tài)等綜合鑒定，純度可達(dá)80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形、梭形、多角形，形態(tài)多樣
傳代特性 屬于高度分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： | 二、免疫熒光鑒定： |
| 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； |
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
SLAP2抗體 生長因子受體結(jié)合蛋白2封閉多肽 人β-淀粉樣前體蛋白(β-APP)ELISA試劑盒
SAMD12蛋白抗體 神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調(diào)節(jié)蛋白2封閉多肽 人β淀粉樣多肽42(Aβ 42)試劑盒ELISA
前列腺雄激調(diào)節(jié)蛋白抗體 1號(hào)染色體開放閱讀框65封閉多肽 人β淀粉樣蛋白25-35(Aβ25-35)ELISA檢測試劑盒
FKRP蛋白抗體 細(xì)胞分裂核仁蛋白1封閉多肽 人β氨基己糖苷A(β-Hex A)ELISA試劑盒
腺樣癌特異性相關(guān)抗原EMC1抗體 22號(hào)染色體開放閱讀框9封閉多肽 人β4整合(ITG β4/CD104)試劑盒ELISA
G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 FAM164B蛋白封閉多肽 人β2轉(zhuǎn)鐵蛋白(β2TF)檢測試劑盒elisa
鋅指蛋白537抗體 端粒抑制因子PinX-1封閉多肽 人β2整合(ITG β2/CD11+CD18)ELISA試劑盒
豬細(xì)小病毒VP2蛋白抗體 溶質(zhì)載體家族蛋白7成員3封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)試劑盒ELISA
雌激相關(guān)受體β抗體 胱抑S/半胱氨抑制劑S封閉多肽 人β1腎上腺能受體(β1AR)抗體ELISA檢測試劑盒
鳥苷環(huán)化激活蛋白1抗體 黑色瘤相關(guān)抗原2封閉多肽 人β1,4-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移2(B4GALNT2)ELISA試劑盒
乳脫氫LDH-C/腫瘤/睪丸抗原32抗體 熱反應(yīng)蛋白12封閉多肽 人β,β胡蘿卜9',10'加氧(BCO2)試劑盒ELISA
PE標(biāo)記小鼠抗人CD45單克隆抗體 CD59封閉多肽 人α-烯醇化(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)檢測試劑盒elisa
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體 通用轉(zhuǎn)錄因子2H亞基2C封閉多肽 人α酮戊二脫氫(α-KGDHC)ELISA試劑盒
24α7羥化抗體 磷化絲氨/蘇氨蛋白激MAK封閉多肽 人α葡萄糖苷(α-glucosidase)試劑盒ELISA
癌基因ETS2抗體 血管非炎癥分子1封閉多肽 人α肌動(dòng)蛋白(α Actin)ELISA檢測試劑盒
絲裂原活化蛋白激磷p38γ抗體 神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK6封閉多肽 人α-黑色細(xì)胞刺激(α-MSH)ELISA試劑盒
跨膜蛋白180抗體 鋅指蛋白235封閉多肽 人α-輔肌動(dòng)蛋白4(ACTN-4)試劑盒ELISA
雙特異性磷抗體19抗體 H2B組蛋白家族M蛋白封閉多肽 人α-輔肌動(dòng)蛋白1(ACTN-1)檢測試劑盒elisa
大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)OAR-L1綿羊肺成纖維（原代永生化）細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱：OAR-L1細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML
pac2斑馬魚胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱：pac2細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML
pac2斑馬魚胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱：pac2細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML
人膽囊上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱：人膽囊上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基100ML
人膽囊上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱：人膽囊上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML
人胰腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱：人胰腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基100ML
人胰腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱：人胰腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML
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