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大鼠前脂肪細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:44:27瀏覽次數(shù):290

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 脂肪組織
大鼠前脂肪細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人星形膠質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人少突膠質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人神經(jīng)干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人小膠質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠前脂肪細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

脂肪組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成,聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng),參與多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為能量?jī)?chǔ)存的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細(xì)胞:一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細(xì)胞;另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞呈梭形,有分裂和增殖的能力;成熟的脂肪細(xì)胞呈圓形,已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪細(xì)胞是一類具有增殖和向脂肪細(xì)胞分化能力的特異化前體細(xì)胞,與肥胖有著非常密切的關(guān)系。前脂肪細(xì)胞是一種類成纖維細(xì)胞,在演變的過程中不斷吸收脂質(zhì),終成為成熟的脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞對(duì)外界機(jī)械損傷的抵抗力較強(qiáng),可望成為軟組織缺損的有益填充物。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)油紅O染色檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

基因抑制元件1抗體 ETS結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子FEV封閉多肽 豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物(LPO) ELISA試劑盒

英文名稱: EIF2S1 SAPS結(jié)構(gòu)域家族3封閉多肽 豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs) 試劑盒 ELISA

絲氨脫水SDS抗體 同源盒蛋白A2封閉多肽 豚鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra) ELISA檢測(cè)試劑盒

胱抑C單克隆抗體 長(zhǎng)鏈脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1封閉多肽 豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13) ELISA Kit

丙氨乙醛轉(zhuǎn)氨單克隆抗體 脫磷結(jié)構(gòu)域蛋白封閉多肽 豬低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α) ELISA試劑盒

環(huán)指蛋白105抗體 四分子交聯(lián)體5封閉多肽 豬鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(GSLT1)試劑盒 ELISA

酪蛋白激casein kinase Iα抗體 肌管相關(guān)蛋白14封閉多肽 豬松弛肽/松弛(RLN)ELISA檢測(cè)試劑盒

孕激受體單克隆抗體 賴氨特異性去甲基5B封閉多肽 豬流感病毒A(FLU A)ELISA Kit

可溶性P選擇抗體 膠質(zhì)纖維性蛋白封閉多肽 豬孕激/孕酮(PROG)ELISA試劑盒

補(bǔ)體因子I輕鏈抗體 磷乙醇胺轉(zhuǎn)移2封閉多肽 豬白介-5(IL-5)試劑盒 ELISA

細(xì)胞表面趨化因子受體7單克隆抗體 胰封閉多肽 豬層連蛋白/板層(LN)ELISA檢測(cè)試劑盒

溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族30成員2抗體 亮氨氨基肽3封閉多肽 豬Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)  ELISA Kit

腦膜瘤蛋白1抗體 多腺苷二磷多聚封閉多肽/多聚ADP-核糖聚合1封閉多肽 豬可溶性E選擇(sE-selectin) ELISA試劑盒

英文名稱: phospho-C-Myc (Ser62) Ki67蛋白封閉多肽 豬白介13(IL-13) 試劑盒 ELISA

聚合延伸因子2抗體 尿苷磷合成封閉多肽 豬轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2) ELISA檢測(cè)試劑盒

9號(hào)染色體開放閱讀框174抗體 脫氧核糖核2B封閉多肽 豬E選擇(E-Selectin/CD62E)ELISA Kit

TWIST蛋白2抗體抗體 FRZB蛋白封閉多肽 豬褪黑(MT)ELISA試劑盒

自水解結(jié)構(gòu)域5蛋白抗體 H2A組蛋白家族E蛋白封閉多肽 豬白介12(IL-12/P40)試劑盒 ELISA
大鼠前脂肪細(xì)胞原代間充質(zhì)干細(xì)胞添加劑英文名稱:原代間充質(zhì)干細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代內(nèi)皮祖細(xì)胞添加劑英文名稱:原代內(nèi)皮祖細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代神經(jīng)干細(xì)胞添加劑英文名稱:原代神經(jīng)干細(xì)胞添加劑10mL(50X)

原代周細(xì)胞添加劑英文名稱:原代周細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代雪旺細(xì)胞添加劑英文名稱:原代雪旺細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代黑色細(xì)胞添加劑英文名稱:原代黑色細(xì)胞添加劑5mL(100X)

原代骨骼肌細(xì)胞添加劑英文名稱:原代骨骼肌細(xì)胞添加劑5mL(100X)

 


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