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大鼠滑膜細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 11:05:06瀏覽次數(shù):282

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 滑膜組織
大鼠滑膜細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶RWPE-1 (人正常前列腺上皮細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠NG2細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶UM-UC-3 (人膀胱移行細(xì)胞癌) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶DH82 (犬巨噬細(xì)胞/狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞)(種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠滑膜細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

滑膜組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自滑膜組織;滑膜組織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu),各種關(guān)節(jié)內(nèi)疾病均會(huì)累及滑膜。而滑膜細(xì)胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),同時(shí)在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關(guān)節(jié)炎(OA)以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?,其病理改變累及關(guān)節(jié)的各個(gè)組成部分,但絕不僅局限于軟骨,還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響,相互作用,共同加速關(guān)節(jié)的退變?;ぜ?xì)胞是構(gòu)成滑膜層的大細(xì)胞群體,是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),它包埋在顆粒狀無(wú)定性的基質(zhì)中,基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布?;び葾型(巨噬樣滑膜細(xì)胞)、B型(成纖維樣滑膜細(xì)胞)以及C型(樹(shù)突細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞)細(xì)胞組成。滑膜細(xì)胞主要功能:①滑膜細(xì)胞產(chǎn)生潤(rùn)滑液成分,并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤(rùn)滑液交換有關(guān);②滑膜細(xì)胞增生,表現(xiàn)為不依賴(lài)于支持物生長(zhǎng),并且分泌大量的效應(yīng)分子來(lái)促進(jìn)炎癥和關(guān)節(jié)損壞;③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

HMX3蛋白抗體 NFE2相關(guān)因子樣蛋白3封閉多肽 

胎盤(pán)表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子1蛋白抗體 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1封閉多肽 

遺傳性前列腺癌蛋白2抗體 TRIM66蛋白封閉多肽 

S轉(zhuǎn)移2抗體 堿性螺旋-環(huán)-螺旋轉(zhuǎn)錄因子SCXA封閉多肽 

猴痘病毒A29L抗體 白細(xì)胞介28A封閉多肽 

EIF2B2蛋白抗體 SPIRE1蛋白封閉多肽 

跨膜結(jié)構(gòu)域邊緣蛋白CEE抗體 NFKB激活蛋白封閉多肽 

雙特異性磷2抗體 微管相關(guān)蛋白封閉多肽 

GADD45G抗體 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)接頭蛋白2封閉多肽 

磷化蛋白激C theta抗體 腺苷受體A3封閉多肽 

磷化核糖體S6激RSK2抗體 去甲腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺轉(zhuǎn)運(yùn)體封閉多肽 

煙堿型乙酰受體ε抗體 急性髓細(xì)胞白血病1蛋白封閉多肽 

IL-2誘導(dǎo)型T細(xì)胞激抗體 磷化gp130封閉多肽 

促甲狀腺β亞單位抗體 細(xì)胞色P450 2D10封閉多肽 

乳腺癌基因刪除蛋白2抗體 G蛋白偶聯(lián)受體108封閉多肽 

電導(dǎo)鈣激活鉀通道蛋白1抗體 核苷交換因子4 

端粒調(diào)控因子2抗體 調(diào)控周期蛋白依賴(lài)蛋白激SEI2封閉多肽 

細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體 G蛋白偶聯(lián)受體172B封閉多肽 
大鼠滑膜細(xì)胞人口腔黏膜成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

PL45 (人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞) DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

K7M2 wt [K7M2-WT] (小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞) (種屬鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠腸道干細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

兔主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

 


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