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大鼠卵巢成纖維細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 16:16:54瀏覽次數(shù):271

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 卵巢組織
大鼠卵巢成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠鼻腔粘膜上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠眼外肌成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠眼微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠卵巢成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

卵巢組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu),而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來;成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的卵巢成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。卵巢成纖維細(xì)胞大多分布于卵巢表面,其主要特點和功能:①成纖維細(xì)胞在體外易于培養(yǎng);②卵巢損傷后,成纖維細(xì)胞能修復(fù)和重塑卵巢;③能在卵巢炎癥時有效控制炎癥擴(kuò)散。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

磷化三磷腺檸檬裂解抗體 微管相關(guān)末端結(jié)合蛋白2封閉多肽 

英文名稱: LMO2 原發(fā)性纖毛運動障礙相關(guān)蛋白DPCD封閉多肽 

FAM57B蛋白抗體 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白116封閉多肽 

MYRIP蛋白抗體 環(huán)指蛋白213封閉多肽 

組蛋白賴氨N-甲基2G抗體 造血祖細(xì)胞激1封閉多肽 

9號染色體開放閱讀框140抗體 重組小鼠Thy-1蛋白 

NF-κB活化激抗體 血小板白細(xì)胞C激底物同源結(jié)構(gòu)域M2封閉多肽 

磷化細(xì)絲蛋白A抗體 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47封閉多肽 

Cy5.5標(biāo)記小鼠抗人CD3單克隆抗體 胞環(huán)蛋白肌動蛋白結(jié)合蛋白封閉多肽 

視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX2抗體 OVOS2蛋白封閉多肽 

黑色瘤相關(guān)抗原4抗體 泛樣核糖體蛋白S30/MNSF-β封閉多肽 

骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T抗體 Sema6A封閉多肽 

神經(jīng)突觸前膜胞內(nèi)蛋白18抗體 組蛋白HIST1H2AL封閉多肽 

磷化肌球蛋白調(diào)節(jié)多肽9(平滑肌亞型)抗體 蛋白激PKR抑制蛋白PRKRIR封閉多肽 

β淀粉樣肽1-40單克隆抗體 免疫球蛋白超家族成員3封閉多肽 

?磷葡萄糖變位/?-phosphoglucomutase抗體 轉(zhuǎn)錄因子HES3封閉多肽 

ECT2L蛋白抗體 泛結(jié)合UFC1封閉多肽 

轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子MRG15抗體 2號染色體開放閱讀框66封閉多肽 
大鼠卵巢成纖維細(xì)胞小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

BME(不含L-)500mL-

PLC/PRF/5細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4PLC/PRF/5細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持PLC/PRF/5細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含PLC/PRF/5細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于PLC/PRF/5細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

雞腎小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL雞腎小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持雞腎小管上皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含雞腎小管上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于雞腎小管上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

293H細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4293H細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持293H細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含293H細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于293H細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM低糖 (含L-丙氨酰-L-)500mL-

WI38/VA13細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4WI38/VA13細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持WI38/VA13細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含WI38/VA13細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于WI38/VA13細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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