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人骨髓單核細(xì)胞

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更新時間:2023-04-23 10:25:15瀏覽次數(shù):249

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 骨髓
人骨髓單核細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:C127 [C-127] (小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠破骨細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶NCI-H520 (人肺鱗癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠胰腺腺泡細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單核細(xì)胞是一種未成熟的單核細(xì)胞,在骨髓細(xì)胞中約占0.04%,被認(rèn)為是破骨細(xì)胞的前體細(xì)胞,較外周血單個核細(xì)胞誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞得率高、全骨髓誘導(dǎo)法產(chǎn)生的破骨細(xì)胞數(shù)量多,純度高,較脾細(xì)胞誘導(dǎo)法分化效率高。骨髓單核細(xì)胞(BMMNCs)是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細(xì)胞,它屬干細(xì)胞類型。目前,大多數(shù)研究用淋巴細(xì)胞分離液分離提取骨髓單核細(xì)胞,近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細(xì)胞。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  巨噬細(xì)胞樣

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人骨髓單核細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨髓

1.png

實(shí)驗(yàn)報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠抗人CD273 (B7-DC, PD-L2)單克隆抗體 磷化乳腺癌抗雌激耐藥蛋白1封閉多肽 

KHDRBS2蛋白抗體 類表皮生長因子域7封閉多肽 

即早反應(yīng)蛋白3相互作用蛋白1抗體 19號染色體開放閱讀框29封閉多肽 

磷化動力蛋白1抗體 脂肪瘤相關(guān)蛋白封閉多肽 

防御β-134/β-defensin 134抗體 重組2 Spike突變蛋白S1(E484Q、L452R、D614G、P681R) 

環(huán)指蛋白113A抗體 鋅指蛋白743封閉多肽 

葡萄糖果糖還原2抗體 重組人同源盒蛋白SIX4 

跨膜蛋白174抗體 20號染色體開放閱讀框7封閉多肽 

縮復(fù)合物亞型蛋白3抗體 CD4封閉多肽 

麥芽糖孔蛋白抗體 磷化組蛋白H2AX封閉多肽 

外殼蛋白COPE抗體 POU5F2蛋白封閉多肽 

FAM107B蛋白抗體 Tristetraprolin封閉多肽 

NFκB激活蛋白205抗體 硒蛋白W封閉多肽 

磷化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 谷氨受體2D封閉多肽 

骨橋蛋白/分泌型磷蛋白1抗體 中胚層誘導(dǎo)早期反應(yīng)蛋白2封閉多肽 

糖基轉(zhuǎn)移6結(jié)構(gòu)1抗體 泛結(jié)構(gòu)域蛋白1封閉多肽 

尾加壓2相關(guān)肽抗體 生長因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)蛋白3封閉多肽 

水通道蛋白5抗體 富含半胱氨分泌蛋白2封閉多肽 
人骨髓單核細(xì)胞MA-891細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4MA-891細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MA-891細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MA-891細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MA-891細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM低糖 (不含酚紅、L-)500mL-

人骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人骨骼肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人骨骼肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人骨骼肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

CNE細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4CNE細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持CNE細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含CNE細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于CNE細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM高糖(不含酚紅、L-)500mL-

HCC1806細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4HCC1806細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HCC1806細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HCC1806細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HCC1806細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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