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大鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞

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更新時間:2023-04-21 13:55:37瀏覽次數(shù):272

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 胚胎組織
大鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞的相關產(chǎn)品:PANC-1人胰腺癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLPANC-1人胰腺癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLPANC10.05人胰腺癌 細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLPANC10.05人胰腺癌 細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLPATU8988t(PATU8988)人胰腺癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125ML

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

胚胎

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自胚胎肢芽;胚胎肢芽存在于兩棲類以上的大多數(shù)脊椎動物胚胎中,在四肢發(fā)生的初期階段,在身體兩側(cè)有呈芽狀的突起,內(nèi)部是中胚層側(cè)板的體壁板垱厚形成,表面有表皮覆蓋。在這個中胚層區(qū)肢芽迅速伸長,不久,在其前端即見有指的突起。在此時期間,其內(nèi)部的中胚層分化成軟骨、肌肉等。這些分化組織,在將肢芽作分離培養(yǎng)的時候也可以獲得。根據(jù)對兩棲類的有尾類的研究,作為肢原基各部的胚發(fā)能力,肢芽物質(zhì)的大部分是位于背半部,而前半部主要參與基部形成,后半部參與前端的形成。在實驗上,即使將肢的原基分成二半,每一半調(diào)整好都可形成基本上近于正常形態(tài)的肢體,而且肢體各軸的極性和側(cè)性也逐漸決定。間充質(zhì)干細胞(MSC)是屬于中胚層的一類多能干細胞,主要存在于結(jié)締組織和器官間質(zhì)中,是具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞;這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數(shù)量,并在特定條件下轉(zhuǎn)變成為一種或多種構成人體組織或器官的細胞,從而在組織修復等方面發(fā)揮積極作用。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3-5代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

磷化酪氨激B(Tyr817)抗體 組蛋白H3.1封閉多肽 人補體蛋白5(C5)ELISA試劑盒

英文名稱: Centromeric histone H3-like protein-2 KIAA0859蛋白封閉多肽 人補體C1q腫瘤壞死因子相關蛋白1(C1QTNF1/CTRP1)試劑盒ELISA

CD52抗體 Strep-Tag II多肽 人補體1抑制物抗體-IgM(C1INH-IgM)ELISA檢測試劑盒

Tau微管蛋白激2抗體 β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移2封閉多肽 人補體1抑制物抗體-IgG(C1INH-IgG)ELISA試劑盒

RNA結(jié)合蛋白22抗體 磷脂酰肌醇激催化亞單位p101封閉多肽 人玻連蛋白(VTN)試劑盒ELISA

β晶體體蛋白A4/βA4-crystallin抗體 Wnt信號受體蛋白封閉多肽 人并殖吸蟲抗體(IgM)檢測試劑盒elisa

胰高血糖樣肽-2抗體 載脂蛋白E2受體封閉多肽 人并殖吸蟲抗體(IgG)ELISA試劑盒

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 半胱胺蛋白-12封閉多肽 人丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原(HCV core Ag)試劑盒ELISA

c-mer原癌基因酪氨激抗體 磷化白介2受體α鏈封閉多肽 人丙酰羧化β多肽(PCCB)ELISA檢測試劑盒

黑色瘤抑制活性蛋白抗體 G蛋白結(jié)合蛋白RAB6A封閉多肽 人丙(ACR)ELISA試劑盒

鉀離子通道蛋白16抗體 乙酰肝封閉多肽 人脫氫E1(PDH E1)試劑盒ELISA

X染色體開放閱讀框23抗體 黑細胞特異性轉(zhuǎn)運蛋白封閉多肽 人激R型同工(R-PK)檢測試劑盒elisa

RNA結(jié)合蛋白42抗體 DNA損傷結(jié)合蛋白2封閉多肽 人醛(MGO)ELISA試劑盒

多囊腎蛋白2抗體 磷化白介-1受體相關激4封閉多肽 人丙二單酰(malonyl CoA)試劑盒ELISA

磷化原癌蛋白CBL2抗體 脫氧雙加氧封閉多肽 人別孕/3α,5α-四氫孕酮(AP/3α,5α-THP)ELISA檢測試劑盒

CD174抗體 白介2受體a鏈/IL-2RA封閉多肽 人表皮細胞活化肽因子(CAPF)ELISA試劑盒

組織相容性復合體蛋白1抗體 SFMBT2蛋白封閉多肽 人表皮生長因子樣結(jié)構域蛋白7(EGFL7)試劑盒ELISA

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A封閉多肽 人表皮生長因子受體2(sp185/Her2)檢測試劑盒elisa
大鼠胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞V79倉鼠肺細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:V79細胞專用培養(yǎng)基500ML

3D4/21豬肺泡巨噬細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:3D4/21細胞專用培養(yǎng)基125ML

3D4/21豬肺泡巨噬細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:3D4/21細胞專用培養(yǎng)基500ML

PK-13豬腎系細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:PK-13細胞專用培養(yǎng)基125ML

PK-13豬腎系細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:PK-13細胞專用培養(yǎng)基500ML

PK-15豬腎細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:PK-15細胞專用培養(yǎng)基125ML

PK-15豬腎細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:PK-15細胞專用培養(yǎng)基500ML

 


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