化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 組織來源 | 乳腺組織 |
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 組織來源 |
大鼠乳腺成纖維細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 乳腺組織 |
商品詳細(xì)介紹：
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：
分離自乳腺組織；乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間，淺筋膜伸向乳腺組織內(nèi)形成條索狀的小葉間隔，一端連于胸肌筋膜，另一端連于皮膚，將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。乳腺是哺乳動(dòng)物少數(shù)可以重復(fù)經(jīng)歷生長(zhǎng)、功能分化和退化過程的器官之一。纖維結(jié)締組織伸入乳腺組織之間，形成許多間隔，這些纖維結(jié)締組織對(duì)乳房起固定作用，而纖維結(jié)締組織是由成纖維細(xì)胞構(gòu)成的。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的乳腺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
5.方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： | 二、免疫熒光鑒定： |
| 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； |
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白2抗體 ZNHIT2蛋白封閉多肽
磷脂酰肌醇激（PI3Kβ）抗體 WDR91蛋白封閉多肽
低分子量神經(jīng)絲蛋白單克隆抗體 神經(jīng)叢蛋白A3封閉多肽
血小板衍化生長(zhǎng)因子γ抗體 19號(hào)染色體開放閱讀框22封閉多肽
神經(jīng)突觸粘附樣分子4抗體 精氨加壓受體2封閉多肽
FAM134A蛋白抗體 結(jié)構(gòu)蛋白家族1封閉多肽
磷化突觸融合蛋白1(Ser14)抗體 皮屑樣蛋白2封閉多肽
磷化細(xì)胞核因子抗體 CD209b封閉多肽
ETV3蛋白抗體 蛋白磷1調(diào)節(jié)亞單位18封閉多肽
CD20單克隆抗體 KIAA0664蛋白封閉多肽
多核苷磷化蛋白抗體 雙特異性磷封閉多肽18封閉多肽
TRIM35蛋白抗體 樣蛋白1封閉多肽
SCRIBBLE蛋白抗體 甲基化P53(Mono Methyl Lys370)封閉多肽
交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 核突觸蛋白-γ封閉多肽
肌球蛋白重鏈9抗體 環(huán)指蛋白47封閉多肽
微管相關(guān)蛋白2抗體 原鈣粘蛋白γC3封閉多肽
腦蛋白4抗體 神經(jīng)粘蛋白封閉多肽
3號(hào)染色體開放閱讀框70抗體 組氨性磷結(jié)構(gòu)域蛋白2A封閉多肽
大鼠乳腺成纖維細(xì)胞小鼠口腔黏膜成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
INS-1 (大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確)RPMI-1640＋10% FBS＋50μmol/L β-mercaptoethanol＋1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
雞小腸黏膜上皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
BNL 1ME A.7R.1 (小鼠肝上皮細(xì)胞)DMEM＋10% FBS＋1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
Hepa 1-6 (小鼠肝癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)DMEM＋10% FBS＋1mM Sodium Pyruvate＋1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
化工儀器網(wǎng)