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人鼻黏膜成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 13:08:01瀏覽次數(shù):295

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 0.2ml/200μg
貨號(hào) BJ-YK1892 主要用途 科研實(shí)驗(yàn)
組織來(lái)源 鼻黏膜組織    
人鼻黏膜成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:FTC-133人甲狀腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLFTC-133人甲狀腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLGBC-SD 人膽囊癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLGBC-SD 人膽囊癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLGBC-SD+LUC 人膽囊癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

人鼻黏膜成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

鼻黏膜組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自鼻黏膜組織;黏膜是覆蓋在人體內(nèi)消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu),由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。根據(jù)部位不同,有口腔黏膜、胃腸黏膜、鼻腔黏膜、氣管黏膜、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結(jié)構(gòu)也因功能、部位不一而不盡相同。鼻腔黏膜,簡(jiǎn)稱鼻黏膜,覆蓋于鼻腔表面,黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3-5代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

絲氨蘇氨激1受體相互作用蛋白抗體 溶血磷脂1封閉多肽 大鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒

結(jié)蛋白抗體 泛激1封閉多肽 大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)試劑盒ELISA

骨保護(hù)蛋白配體/破骨細(xì)胞分化因子抗體 褪黑激相關(guān)受體封閉多肽 大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA檢測(cè)試劑盒

CD3D抗體 激肽釋放15封閉多肽 大鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)elisa試劑盒

蛋白激C亞性D型抗體 抑癌基因5封閉多肽 大鼠纖連蛋白(FN)試劑盒elisa

促進(jìn)調(diào)解蛋白家族2A抗體 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白2B封閉多肽 大鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)檢測(cè)試劑盒elisa

α1抗體 生長(zhǎng)激誘導(dǎo)跨膜蛋白封閉多肽 大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒

英文名稱: PDPK1 內(nèi)著絲粒蛋白封閉多肽 大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)試劑盒ELISA

磷化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體 C-SKI封閉多肽 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA檢測(cè)試劑盒

F-box蛋白家族FBXO31抗體 整合alpha E2 封閉多肽 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)elisa試劑盒

即刻早期基因ARC抗體 小腸型脂肪結(jié)合蛋白封閉多肽 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒elisa

Complexin I/復(fù)合1抗體 肝細(xì)胞粘附分子2封閉多肽 大鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)檢測(cè)試劑盒elisa

eIF2Bγ單克隆抗體 磷化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)封閉多肽 大鼠活化A(ACV-A)ELISA試劑盒

BXDC2蛋白抗體 周期依賴性激1封閉多肽 大鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒ELISA

髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體 胞漿亮氨tRNA連接封閉多肽 大鼠血管緊張轉(zhuǎn)化(ACE)ELISA檢測(cè)試劑盒

FITC標(biāo)記小鼠抗人CD22單克隆抗體 腺苷單磷活化蛋白激α1封閉多肽 大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)elisa試劑盒

轉(zhuǎn)錄因子HES-1抗體 蛋白賴氨-6-氧化封閉多肽 大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)試劑盒elisa

細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子單克隆抗體 磷化細(xì)胞核因子NF-κB p65封閉多肽 裸鼠環(huán)加氧2(COX-2)檢測(cè)試劑盒elisa
人鼻黏膜成纖維細(xì)胞NCI-H1944人肺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H1944細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

NCI-H1944人肺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H1944細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

NCI-H1975人肺腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H1975細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

NCI-H1975人肺腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H1975細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

NCI-H2126人肺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H2126細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

NCI-H2126人肺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H2126細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

NCI-H226人肺鱗癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H226細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

 


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