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大鼠肝星狀細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:42:13瀏覽次數(shù):286

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 肝臟組織
大鼠肝星狀細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人視網(wǎng)膜muller細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人牙齦干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人牙齦上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠肝星狀細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肝臟組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細(xì)胞(HSC)又名肝貯脂細(xì)胞、維生素A貯存細(xì)胞、竇周細(xì)胞、Ito細(xì)胞等,是肝臟細(xì)胞外基質(zhì)的主要來(lái)源。HSC在激活后可進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞,各種可導(dǎo)致肝纖維化的因素均將HSC作為終靶細(xì)胞。正常情況下,HSC處于靜止?fàn)顟B(tài),當(dāng)肝臟發(fā)生炎癥反應(yīng)或受到機(jī)械刺激等損傷時(shí),HSC的表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ钚?,激活的HSC可通過(guò)增生和分泌細(xì)胞外基質(zhì)參與肝纖維化的形成及肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建,此過(guò)程也是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。肝星形細(xì)胞分布于肝臟的Disse間隙內(nèi),是合成、分泌細(xì)胞外基質(zhì)的主要來(lái)源,在肝纖維化的發(fā)生中處于重要地位。肝星形細(xì)胞是肝臟*的間充質(zhì)細(xì)胞,約占肝臟細(xì)胞總數(shù)的8%-13%。作為肝臟合成細(xì)胞外基質(zhì)的主要細(xì)胞群,肝星形細(xì)胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分,合成一定量的膠原以維持正常的基底膜結(jié)構(gòu),還能通過(guò)其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調(diào)節(jié)。此外,肝星形細(xì)胞能通過(guò)合成肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子等促進(jìn)肝細(xì)胞增殖和肝再生。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

口蹄疫病毒O型VP1抗體 泛結(jié)合E2J1封閉多肽 大鼠降鈣(CT)ELISA試劑盒

細(xì)胞骨架銜接蛋白BIN3抗體 泛蛋白連接E2I封閉多肽 大鼠骨鈣/骨谷氨蛋白(OT/BGP)試劑盒 ELISA

轉(zhuǎn)錄起始因子1A抗體 分子伴侶復(fù)合體TCP-1β封閉多肽 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化FMS樣酪氨激3抗體 FAM90A1蛋白封閉多肽 大鼠促甲狀腺(TSH) ELISA Kit

轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G3PP抗體 富含亮氨重復(fù)蛋白10封閉多肽 大鼠(Cortisol)ELISA試劑盒

AN1型鋅指蛋白5抗體 錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族3封閉多肽 大鼠雌二醇(E2)試劑盒 ELISA

轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白TRRAP抗體 Toll樣受體4相關(guān)蛋白封閉多肽 大鼠脫氫表雄酮硫酯(DHEA-S)ELISA檢測(cè)試劑盒

造血干細(xì)胞特異性相關(guān)結(jié)合蛋白3抗體 EXOSC8蛋白封閉多肽 大鼠睪酮(T)ELISA Kit

整合樣金屬與15型抗體 重組人FLT3/Flk-2蛋白 大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒

X連鎖Charcot-Marie-Tooth變相關(guān)蛋白抗體 促卵泡刺激封閉多肽 大鼠雄烯二酮(ASD)試劑盒 ELISA

磷脂酰肌醇激抗體 HERPUD蛋白家族成員2封閉多肽 大鼠雌三醇(E3)ELISA檢測(cè)試劑盒

肝癌衍生生長(zhǎng)因子2抗體 同源盒蛋白HOXB5封閉多肽 大鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA Kit

白介22受體結(jié)合蛋白抗體 磷化蛋白激MST2封閉多肽 大鼠三碘甲狀腺原氨(T3)ELISA試劑盒

β細(xì)胞抗體 SNX29蛋白封閉多肽 大鼠甲狀腺(T4)試劑盒 ELISA

甲基化樣蛋白8抗體 組蛋白去甲基化JMJ2A封閉多肽 大鼠游離甲狀腺(FT4)ELISA檢測(cè)試劑盒

唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集14抗體 N-乙酰轉(zhuǎn)移8B封閉多肽 大鼠游離三碘甲狀腺原氨(Free-T3)ELISA Kit

ZSCAN4蛋白抗體 MYC結(jié)合蛋白2封閉多肽 大鼠新生甲狀腺(NN-T4)ELISA試劑盒

18號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框56抗體 磷化蛋白激C nu型封閉多肽 大鼠胰島(INS)試劑盒 ELISA
大鼠肝星狀細(xì)胞狗軟骨細(xì)胞英文名稱:狗軟骨細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

狗皮下微血管內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:狗皮下微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

狗臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:狗臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

鴨肝間質(zhì)細(xì)胞英文名稱:鴨肝間質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

鴨胚胎成纖維細(xì)胞英文名稱:鴨胚胎成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

鴨腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:鴨腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)培養(yǎng)體系英文名稱:人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)培養(yǎng)體系500mL

 


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