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小鼠肺成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:02:48瀏覽次數(shù):274

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 肺組織
小鼠肺成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠骨髓巨噬細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML小鼠骨髓巨噬細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML雞胚成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML雞胚成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠肺成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肺組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自肺組織;肺是機(jī)體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱(chēng)喉為肺之門(mén)戶(hù),鼻為肺之外竅。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái);成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持肺器官的正常形態(tài),合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3-5代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

松弛3抗體 磷化白細(xì)胞介3受體β封閉多肽 小鼠垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP) ELISA檢測(cè)試劑盒

三磷肌醇3激B抗體 磷化細(xì)胞分裂周期蛋白16封閉多肽 小鼠血管緊張轉(zhuǎn)化(ACE) ELISA Kit

N6AMT2蛋白抗體 雙特異性蛋白磷7封閉多肽 小鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ) ELISA試劑盒

電壓門(mén)控鉀通道Kv8.2抗體 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框47封閉多肽 小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR) 試劑盒 ELISA

突觸融合蛋白6單克隆抗體 微管蛋白β3封閉多肽 小鼠活化A(ACV-A) ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化蛋白激C結(jié)合蛋白2抗體 載脂蛋白C3封閉多肽 小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF) ELISA Kit

磷鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 尿轉(zhuǎn)運(yùn)型糖蛋白A2封閉多肽 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2) ELISA試劑盒

混合系列蛋白激樣結(jié)構(gòu)域單克隆抗體 鋅指蛋白496封閉多肽 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4) 試劑盒 ELISA

C型凝集結(jié)構(gòu)域家族9成員A抗體 視覺(jué)抑制蛋白封閉多肽 小鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6) ELISA檢測(cè)試劑盒

電壓門(mén)控鉀通道亞基Kv7.4抗體 胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7封閉多肽 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15) ELISA Kit

DNA結(jié)合抑制因子2抗體 血紅蛋白α1/α-Globin封閉多肽 小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18) ELISA試劑盒

短鏈脫氫/還原SDRO抗體 FMS樣酪氨激3配體封閉多肽 小鼠(LZM) 試劑盒 ELISA

英文名稱(chēng): Azurocidin/HBP 生物蛋白連接封閉多肽 小鼠可溶性CD30(sCD30) ELISA檢測(cè)試劑盒

親脂性蛋白B抗體 跨膜蛋白166封閉多肽 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2) ELISA Kit

干擾-γ/IFN-γ抗體 環(huán)指蛋白61封閉多肽 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1) ELISA試劑盒

軸絲動(dòng)力蛋白8抗體 白介1α封閉多肽 小鼠粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)  試劑盒 ELISA

自然殺傷細(xì)胞親環(huán)相關(guān)蛋白抗體 組蛋白結(jié)合蛋白RBBP7封閉多肽 小鼠血管緊張轉(zhuǎn)化(ACE)ELISA檢測(cè)試劑盒

核小體組裝蛋白1樣蛋白5抗體 NXP20蛋白封閉多肽 小鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA Kit
小鼠肺成纖維細(xì)胞小鼠髓核細(xì)胞英文名稱(chēng):小鼠髓核細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠破骨細(xì)胞英文名稱(chēng):小鼠破骨細(xì)胞5×105提供化學(xué)染色報(bào)告

小鼠皮膚成纖維細(xì)胞英文名稱(chēng):小鼠皮膚成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠角質(zhì)形成細(xì)胞英文名稱(chēng):小鼠角質(zhì)形成細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠表皮干細(xì)胞英文名稱(chēng):小鼠表皮干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠前脂肪細(xì)胞英文名稱(chēng):小鼠前脂肪細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱(chēng):小鼠脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告


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