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大鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 11:01:21瀏覽次數(shù):268

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 脈絡(luò)膜組織
大鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-175VII (人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞) (DMEM) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人腹膜間皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶B-CPAP [BC-PAP; BCPAP] (人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠真皮毛乳頭細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠腸道干細(xì)胞5×10?C

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

脈絡(luò)膜組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自眼球脈絡(luò)膜組織;脈絡(luò)膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間,含有豐富血管和色素細(xì)胞,對(duì)外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差,當(dāng)眼球受到從前面來(lái)的外力的沖擊作用通過(guò)玻璃體傳到后極部時(shí),堅(jiān)硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,使脈絡(luò)膜在內(nèi)外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡(luò)膜呈暗褐色,圍繞視神經(jīng)乳頭部有照膜,為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡(luò)膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,由纖維組織、小血管和毛細(xì)血管組成,軟而薄,棕紅色,在鞏膜和視網(wǎng)膜之間,續(xù)連于睫狀體后方。脈絡(luò)膜的血循環(huán)營(yíng)養(yǎng)視網(wǎng)膜外層,其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營(yíng)養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及玻璃體,并有遮光作用,使反射的物象清楚。同時(shí)對(duì)視覺(jué)系統(tǒng)起保護(hù)作用,對(duì)整個(gè)視覺(jué)神經(jīng)有調(diào)節(jié)作用。續(xù)連于睫狀體后方,含豐富的血管和色素細(xì)胞,有營(yíng)養(yǎng)和遮光作用。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

軸絲動(dòng)力蛋白1抗體 皮卡丘封閉多肽 

C端結(jié)合蛋白1抗體 配對(duì)盒基因7封閉多肽 

26S體非ATP調(diào)節(jié)亞基11抗體 胞漿5'核苷1B封閉多肽 

血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體 RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白6封閉多肽 

腺苷單磷活化蛋白激α2抗體 二?;视椭睛?DAGLβ 封閉多肽  

磷化白細(xì)胞介-10受體a抗體 DIMT1L蛋白封閉多肽 

7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框43抗體 感覺(jué)神經(jīng)性耳聾常染色體隱性遺傳61封閉多肽 

辣椒受體5抗體 胰脂肪相關(guān)蛋白2封閉多肽 

MS4A15蛋白抗體 Rho的核苷交換因子12封閉多肽 

促卵泡刺激受體抗體 子宮內(nèi)膜封閉多肽 

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體4單克隆抗體 細(xì)胞死亡防衛(wèi)蛋白1封閉多肽 

肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白CFL抗體 T淋巴細(xì)胞分化蛋白MAL2封閉多肽 

神經(jīng)元膜糖蛋白錨定蛋白2抗體 14號(hào)染色體開(kāi)放閱框35封閉多肽 

眼睛發(fā)育缺失蛋白EYA2抗體 酮基移換樣蛋白1封閉多肽 

乙醇脫氫1抗體 磷化粘著斑激封閉多肽 

英文名稱(chēng): Trk A + B + C 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框6封閉多肽 

黑色瘤相關(guān)抗原3抗體 蝮蛇蛇毒蛋白封閉多肽 

絲裂原活化蛋白激1/2單克隆抗體 KHSRP蛋白封閉多肽 
大鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞NCI-H520 (人肺鱗癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠胰腺腺泡細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

人骨髓來(lái)源巨噬細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

兔肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

人宮頸癌成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠心肌細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶


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