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大鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 13:30:36瀏覽次數(shù):264

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 脊髓組織
大鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:KLE人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLKNS-89人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLKNS-89人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLKTC-1人甲狀腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLKTC-1人甲狀腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

脊髓組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自脊髓組織;脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護;是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū),主要由神經(jīng)細(xì)胞構(gòu)成;在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),主要由有髓神經(jīng)纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié),31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)系統(tǒng)基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是神經(jīng)元,即神經(jīng)細(xì)胞,其大小和外觀在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體,內(nèi)含神經(jīng)絲、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和一個有明顯核仁的核。一些大神經(jīng)元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示,在光鏡下是灰藍(lán)色斑塊狀,稱為尼氏小體。樹突和軸突是神經(jīng)元的突起,能在神經(jīng)元之間傳遞電沖動,突起的大小和形態(tài)各不相同,很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。脊髓組織內(nèi)含有大量膠質(zhì)細(xì)胞,神經(jīng)元含量少,分離純化難度大,且脊髓神經(jīng)元細(xì)胞是高度分化的終末細(xì)胞,不能分裂增殖,培養(yǎng)要求高。剛接種的脊髓神經(jīng)元呈圓形,體積小,透亮,無突起。培養(yǎng)2-3d,可見胞體增大,突起增多延長;培養(yǎng)6-7d,細(xì)胞體大飽滿,突起明顯增加延長并交織成網(wǎng),光暈明顯,立體感強。培養(yǎng)20d后,死亡細(xì)胞明顯增加,細(xì)胞出現(xiàn)內(nèi)空泡,突起粗細(xì)不均,甚至脫壁,發(fā)生細(xì)胞崩解。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原 - 胰聯(lián)合消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性  屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液  0.125%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

Kelch樣蛋白3抗體 非受體性蛋白酪氨激ETK封閉多肽 人乳腺癌標(biāo)志物CA15-3(CA15-3)ELISA試劑盒

肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移1A抗體 環(huán)指蛋白27封閉多肽 人乳頭狀瘤病毒抗體試劑盒ELISA

胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 醛縮2封閉多肽 人乳頭狀瘤病毒抗體(IgM)ELISA檢測試劑盒

磷化激M2抗體 凋亡相關(guān)蛋白5封閉多肽 人乳頭狀瘤病毒抗體(IgG)ELISA試劑盒

英文名稱: Cytokeratin 5 FBXO4蛋白封閉多肽 人乳頭狀瘤病毒18型毒衣殼蛋白L1(HPV18L1)抗體(IgG)試劑盒ELISA

胞漿支鏈氨基轉(zhuǎn)氨抗體 VAC14蛋白封閉多肽 人乳頭狀瘤病毒18型(HPV18)抗體(IgG)檢測試劑盒elisa

磷化雙皮質(zhì)抗體 KCNH3蛋白封閉多肽 人乳頭狀瘤病毒16型毒衣殼蛋白L1(HPV16L1)抗體(IgG)ELISA試劑盒

DNA連接3抗體 LANCL3蛋白封閉多肽 人乳頭狀瘤病毒16型(HPV16)抗體(IgM)試劑盒ELISA

英文名稱: ERK2 9號染色體開放閱讀框95封閉多肽 人乳頭狀瘤病毒16型(HPV16)抗體(IgG)ELISA檢測試劑盒

去甲腎上腺轉(zhuǎn)運蛋白/神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺轉(zhuǎn)運體抗體 PDHA2蛋白封閉多肽 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)抗體(IgG)ELISA試劑盒

英文名稱: Villin ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運因子1封閉多肽 人乳糖凝集8(LGALS8)試劑盒ELISA

細(xì)胞色CYP3A1抗體 無精癥缺失基因1封閉多肽 人乳脫氫A(LDHA)檢測試劑盒elisa

細(xì)胞色P450Ⅱj3抗體 腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR封閉多肽 人乳清磷核糖轉(zhuǎn)移(OPRT)ELISA試劑盒

磷化蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗體 毒蕈堿型乙酰受體M4封閉多肽 人乳過氧化物(LPO)試劑盒ELISA

英文名稱: Calretinin 磷化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1封閉多肽 瘤抗原1(SAGE1)ELISA檢測試劑盒

磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白3A1封閉多肽 堿O-棕櫚?;D(zhuǎn)移1,肝亞型(CPT1A/CPT1)ELISA試劑盒

脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體 鋅指蛋白651封閉多肽 堿試劑盒ELISA

鋅指蛋白81抗體 泛連接Siah1封閉多肽 毒堿脂酰轉(zhuǎn)移(CACT)檢測試劑盒elisa
大鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞U-937人淋巴瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:U-937細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

UM-UC-3人膀胱移行癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:UM-UC-3細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

UM-UC-3人膀胱移行癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:UM-UC-3細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

VCAP人前列腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:VCAP細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

VCAP人前列腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:VCAP細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

WERI-RB-1人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:WERI-RB-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

WERI-RB-1人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:WERI-RB-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML


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