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小鼠卵巢上皮細(xì)胞

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更新時間:2023-04-23 09:39:38瀏覽次數(shù):251

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 卵巢組織
小鼠卵巢上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:B27無血清添加劑細(xì)胞培養(yǎng)添加劑10mLPBS緩沖液細(xì)胞培養(yǎng)添加劑500mLDAPI細(xì)胞培養(yǎng)添加劑10mL(即用型)Triton X-100細(xì)胞培養(yǎng)添加劑10mLFluoromount-G熒光封片劑細(xì)胞培養(yǎng)添加劑25mL

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠卵巢上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

卵巢組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu),而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。卵巢上皮細(xì)胞主要功能:①上皮細(xì)胞能分泌激素,刺激卵細(xì)胞分化成熟;②細(xì)胞能分泌炎癥介質(zhì),參與炎癥反應(yīng)。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白-膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

NFE2相關(guān)因子1抗體 金屬相關(guān)蛋白1封閉多肽 

激活受體1B抗體 豬藍(lán)耳病病毒M蛋白封閉多肽 

酪氨磷受體相互作用蛋白Liprin α2抗體 驅(qū)動蛋白2封閉多肽 

復(fù)合3抗體 整合樣金屬與10型封閉多肽 

免疫球蛋白lambda樣肽1抗體 T淋巴細(xì)胞激活蛋白磷2C封閉多肽 

S期細(xì)胞周期相關(guān)蛋白抗體 磷化細(xì)胞核因子NFKBp65封閉多肽 

Dermokine β蛋白抗體 鋅指FYVE結(jié)構(gòu)域蛋白27封閉多肽 

白介1β/IL-1β抗體 內(nèi)皮轉(zhuǎn)化1封閉多肽 

鋅指蛋白431抗體 谷氧還蛋白2封閉多肽 

蛋白二硫異構(gòu)A6抗體 促凋亡Bik蛋白封閉多肽 

C型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體 核仁磷蛋白封閉多肽 

胰島基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白2抗體 穿孔封閉多肽 

法尼基二磷合抗體 磷化熱休克因子1封閉多肽 

C2CD4D蛋白抗體 乙?;M蛋白H3封閉多肽 

跨膜蛋白TMED4抗體 G蛋白偶聯(lián)受體27封閉多肽 

特異性鉀離子通道蛋白抗體 NBPF3蛋白封閉多肽 

第七號染色體開放閱讀框12抗體 表皮生長因子樣激受體1封閉多肽 

AF488標(biāo)記小鼠抗人CD19單克隆抗體 重組人ANO1蛋白蛋白 
小鼠卵巢上皮細(xì)胞MEM (含NEAA、HEPES,不含L-)500mL-

SBC-2細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4SBC-2細(xì)胞專用培養(yǎng)由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SBC-2細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SBC-2細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SBC-2細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人子宮成纖維細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人子宮成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人子宮成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

SC-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4SC-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SC-1細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SC-1細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SC-1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

FTC-133細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4FTC-133細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持FTC-133細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含F(xiàn)TC-133細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于FTC-133細(xì)胞的體外培養(yǎng)。


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