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人乳腺癌血管周細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 12:42:14瀏覽次數(shù):348

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 乳腺癌組織
人乳腺癌血管周細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人副神經(jīng)節(jié)瘤細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106人腸息肉上皮細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106人原代聽神經(jīng)瘤細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106人原代髓核細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106人原代神經(jīng)鞘膜瘤細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人乳腺癌血管周細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

乳腺癌組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自乳腺癌組織;女性乳腺是由皮膚、纖維組織、乳腺腺體和脂肪組成的,乳腺癌是發(fā)生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤。乳腺癌中99%發(fā)生在女性,男性僅占1%。乳腺并不是維持機(jī)體生命活動(dòng)的重要器官,原位乳腺癌并不致命;但由于乳腺癌細(xì)胞喪失了正常細(xì)胞的特性,細(xì)胞之間連接松散,容易脫落。癌細(xì)胞一旦脫落,游離的癌細(xì)胞可以隨血液或淋巴液播散全身,形成轉(zhuǎn)移,危及生命。目前,乳腺癌已成為威脅女性身心健康的常見腫瘤。周細(xì)胞(pericyte)又稱Rouget細(xì)胞和壁細(xì)胞,是一種包圍全身毛細(xì)血管和靜脈中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞,可以收縮。周細(xì)胞嵌入毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的基膜中,通過物理接觸和旁分泌信號(hào)與內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞通訊,監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的成熟過程。此外,周細(xì)胞還具有調(diào)控毛細(xì)血管血流量、細(xì)胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用,其多功能性是目前研究的熱點(diǎn)之一,所以對(duì)血管周細(xì)胞的生物學(xué)特征、標(biāo)記物、細(xì)胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料。周細(xì)胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細(xì)血管的血流量。周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間共同擁有一個(gè)基膜,基膜上有多種細(xì)胞連接,包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細(xì)血管直徑的雙向調(diào)控;毛細(xì)血管受損時(shí),周細(xì)胞還可增殖,分化為內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白聯(lián)合消化法及不銹鋼網(wǎng)篩過濾法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

甲基化樣蛋白11抗體(N端) DCN1樣蛋白3封閉多肽 小鼠過敏毒/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒

B淋巴細(xì)胞受體相關(guān)蛋白抗體 肝輔助因子II封閉多肽 小鼠三碘甲狀腺原氨(T3)試劑盒ELISA

半胱氨8抗體 RNA聚合I封閉多肽 小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISA檢測(cè)試劑盒

水通道蛋白-3抗體 嗅覺受體5T3封閉多肽 小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)elisa試劑盒

Toll樣受體4(CD284)抗體 原鈣粘蛋白12封閉多肽 小鼠17羥孕酮(17-OHP)試劑盒elisa

突變型P53抗體 常染色體隱性遺傳性耳聾型31蛋白封閉多肽 小鼠卵泡抑(FS)檢測(cè)試劑盒elisa

信號(hào)通路Wnt2B抗體 G蛋白結(jié)合蛋白5封閉多肽 小鼠組織蛋白去乙?;?HD)ELISA試劑盒

絲切蛋白抗體 RNA結(jié)合蛋白18封閉多肽 小鼠雌三醇(E3)試劑盒ELISA

磷化周期B1抗體 Snail蛋白封閉多肽 小鼠雄烯二酮(ASD)ELISA檢測(cè)試劑盒

5號(hào)染色體開放閱讀框51抗體 脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF1封閉多肽 小鼠游離睪酮(F-TESTO)elisa試劑盒

HOXc8抗體 T細(xì)胞介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Tbx21封閉多肽 小鼠睪酮(T)試劑盒elisa

孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體 FAM59A蛋白封閉多肽 小鼠孕激/孕酮(PROG)檢測(cè)試劑盒elisa

RET原癌基因抗體 周期D結(jié)合蛋白1封閉多肽 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒

DNA修復(fù)Ku70抗體 快速周期調(diào)節(jié)蛋白SPDYE1封閉多肽 小鼠降鈣(CT)試劑盒ELISA

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 內(nèi)皮抑/內(nèi)皮他丁封閉多肽 小鼠脫氫表雄酮硫酯(DHEA-S)ELISA檢測(cè)試劑盒

叉頭相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3/FOXC1抗體 鋅指蛋白300封閉多肽 小鼠內(nèi)皮1(ET-1)elisa試劑盒

垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因抗體 指甲髕骨綜合征相關(guān)蛋白NPS1封閉多肽 小鼠雌二醇(E2)試劑盒elisa

FAM153B蛋白抗體 磷化微管相關(guān)蛋白封閉多肽 小鼠(Cortisol)檢測(cè)試劑盒elisa
人乳腺癌血管周細(xì)胞FADu人咽鱗癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:FADu細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

FADu人咽鱗癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:FADu細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

FTC-133人甲狀腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:FTC-133細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

FTC-133人甲狀腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:FTC-133細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

GBC-SD 人膽囊癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GBC-SD細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

GBC-SD 人膽囊癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GBC-SD細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

GBC-SD+LUC 人膽囊癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GBC-SD+LUC細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

 


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