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小鼠終板軟骨細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 11:37:36瀏覽次數(shù):252

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 椎間盤組織
小鼠終板軟骨細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:OS-RC-2人腎癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106OVCAR-3人卵巢腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106OVCAR-8人卵巢癌腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106P53R [JHU-56] 人結(jié)直腸癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106Panc 03.27人胰腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠終板軟骨細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

椎間盤組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自椎間盤終板軟骨組織;椎體終板是椎體在生長發(fā)育過程中,椎體上下面的骨骺板骨化停止后形成骨板,呈輕度凹陷,即為骨性終板。椎體終板的中央仍為一薄層透明軟骨覆蓋,并終生存在,即為軟骨終板,上下軟骨終板與髓核和纖維環(huán)連接共同構(gòu)成椎間盤。椎體終板構(gòu)成了椎間盤的上下邊界,位于椎體中心的松質(zhì)骨和椎間盤之間。是由軟骨下骨和厚度相當(dāng)?shù)母采w其上的軟骨組成。主要作用是防止椎間盤髓核組織嵌入椎體,同時(shí)具有平衡分散應(yīng)力的作用。成熟的終板軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于軟骨陷窩內(nèi),這些終板軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成,稱為同源細(xì)胞群。電鏡下,終板軟骨細(xì)胞有突起和皺褶,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,終板軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的終板軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原 - 中性dan白聯(lián)合消化并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、EGF、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    3-4天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳2-3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

UL16結(jié)合蛋白1蛋白抗體 鋅指蛋白903封閉多肽 人腺苷環(huán)化1(AC-1)ELISA試劑盒

CD4抗體 磷化Runx3封閉多肽 人可溶性腺苷環(huán)化(sAC)試劑盒ELISA

自然殺傷細(xì)胞特異性抗原YIPF3抗體 卷曲螺旋域蛋白質(zhì)85C封閉多肽 人鳥氨脫羧(ODC)ELISA檢測試劑盒

上皮細(xì)胞粘附分子(CD326)抗體 絲氨16封閉多肽 人蛋白酪氨激(PTK/CD115)elisa試劑盒

RNA結(jié)合蛋白34抗體 細(xì)胞表面趨化因子受體2封閉多肽 人蛋白酪氨磷(PTP/PTPase/CD148)試劑盒elisa

MHC I類鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復(fù)合物MHCIa抗體 突觸融合蛋白1A封閉多肽 人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化(TACE)檢測試劑盒elisa

特異性囊腫病液體蛋白15 亨丁頓舞蹈癥相互作用蛋白12/HIP1R封閉多肽 人多形核白細(xì)胞彈性(PMNElastase)ELISA試劑盒

CD20單克隆抗體 造血細(xì)胞磷封閉多肽 人型纖溶原激活物(uPA/PLAU)試劑盒ELISA

磷化非受體性蛋白酪氨激ETK抗體 磷化前病毒整合位點(diǎn)蛋白1封閉多肽 人激肽釋放8(KLK8)ELISA檢測試劑盒

I型膠原蛋白 缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰4羥化封閉多肽 人激肽釋放6(KLK6)elisa試劑盒

周期依賴性激5調(diào)節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體 血管生成3/血管生成4封閉多肽 人果糖1,6二磷醛縮(FDA)試劑盒elisa

MYC啟動(dòng)子結(jié)合蛋白1抗體 半胱胺蛋白-6前體蛋白封閉多肽 人組織D(cath-D)檢測試劑盒elisa

跨膜蛋白SEMA5A抗體 肺癌癌基因蛋白3封閉多肽 人激敏感性脂肪(HSL)ELISA試劑盒

英文名稱: Histone H3  (Tri Methyl K36) FOXK1蛋白封閉多肽 人胰激肽原(PK)試劑盒ELISA

堿性磷(類胎盤型)抗體 磷化微管相關(guān)蛋白封閉多肽 人烏頭2(ACO-2)ELISA檢測試劑盒

磷化表皮生長因子受體抗體 巨核細(xì)胞刺激因子/蛋白多糖4/淺表層粘膜蛋白多糖封閉多肽 人26S體(26SPSM)elisa試劑盒

金屬相關(guān)蛋白1抗體 2號(hào)染色體開放閱讀框65封閉多肽 人周期依賴性激4(CDK-4)試劑盒elisa

細(xì)胞色b5還原3抗體 型鋅指蛋白5封閉多肽 人胎盤堿性磷(PLAP)檢測試劑盒elisa
小鼠終板軟骨細(xì)胞4T1小鼠乳腺癌細(xì)胞英文名稱:4T11×106 1640+10%FBS+1%P/S (STR鼠源鑒定)報(bào)告

4T1+luc小鼠乳腺癌細(xì)胞熒光標(biāo)記英文名稱:4T1+luc1×1061640+10%FBS+1%P/S 提供4T1細(xì)胞鑒定報(bào)告

AML-12小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞英文名稱:AML-121×106D/F12+10%FBS+1%ITS(10ug/mL胰島;轉(zhuǎn)鐵蛋白5.5ug/mL; 5ng/mL硒)+40ng/ml+1%P/S (STR鼠源鑒定)報(bào)告

Ana-1小鼠巨噬細(xì)胞英文名稱:Ana-11×1061640+10%FBS+1%P/S (STR鼠源鑒定)報(bào)告

ATDC5小鼠胚胎瘤細(xì)胞英文名稱:ATDC51×106DMEM+10%FBS+1%P/S(STR鼠源鑒定)報(bào)告

B16小鼠黑色瘤細(xì)胞英文名稱:B161×1061640(或IMDM)+10%FBS+1%P/S (STR鼠源鑒定)報(bào)告

B16-F10小鼠黑色瘤細(xì)胞英文名稱:B16-F101×106DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S(STR鼠源鑒定)報(bào)告

 


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