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人乳腺成纖維細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 15:02:01瀏覽次數(shù):247

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 乳腺組織
人乳腺成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML小鼠脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML豬子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML豬子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML人前庭鞘膜瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人乳腺成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

乳腺組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自乳腺組織;乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間,淺筋膜伸向乳腺組織內(nèi)形成條索狀的小葉間隔,一端連于胸肌筋膜,另一端連于皮膚,將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。乳腺是哺乳動物少數(shù)可以重復(fù)經(jīng)歷生長、功能分化和退化過程的器官之一。纖維結(jié)締組織伸入乳腺組織之間,形成許多間隔,這些纖維結(jié)締組織對乳房起固定作用,而纖維結(jié)締組織是由成纖維細(xì)胞構(gòu)成的。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的乳腺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

DNA拓普西異構(gòu)ⅡA抗體 FBXO34蛋白封閉多肽 小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2) ELISA檢測試劑盒

液泡蛋白分選蛋白37C抗體 G蛋白偶聯(lián)受體GPRC5C蛋白封閉多肽 小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ) ELISA Kit

胞吞蛋白Endophilin 1抗體 轉(zhuǎn)運RNA核糖轉(zhuǎn)移結(jié)構(gòu)域蛋白QTRTD1封閉多肽 小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab) ELISA試劑盒

英文名稱: Human IgM 人C反應(yīng)蛋白 小鼠粘蛋白/粘液5B(MUC5B) 試劑盒 ELISA

TIGAR蛋白抗體 20號染色體開放閱讀框19封閉多肽 小鼠垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP) ELISA檢測試劑盒

環(huán)指蛋白215抗體 G蛋白結(jié)合蛋白6體 小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA) ELISA Kit

英文名稱: phospho-Tau (Thr217) 磷化非受體酪氨蛋白激2封閉多肽 小鼠磷脂酰絲氨(PS) ELISA試劑盒

嗅覺感受器蛋白10R2抗體 血管緊張Ⅱ-1型受體封閉多肽 小鼠磷甘油酯(PC/CPG) 試劑盒 ELISA

磷化DNA依賴性蛋白激抗體 SIKE1蛋白封閉多肽 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP) ELISA檢測試劑盒

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽7輕鏈抗體 FAM118B蛋白封閉多肽 小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF) ELISA Kit

英文名稱: NEUROD1 抗酒石性磷5型/5型性磷封閉多肽 小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm) ELISA試劑盒

轉(zhuǎn)錄因子LBX2抗體 軸索過度生長抑制因子B封閉多肽 小鼠絲氨/蘇氨蛋白磷(STK) 試劑盒 ELISA

NT5DC4蛋白抗體 凝集樣蛋白AGRNL封閉多肽 小鼠高鐵血紅蛋白(MHB) ELISA檢測試劑盒

蛋白偶聯(lián)受體55抗體 磷化絲裂原活化蛋白激1/2封閉多肽 小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2) ELISA Kit

睪丸發(fā)育蛋白SPATA16抗體 血小板源性生長因子AA+BB封閉多肽 小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ) ELISA試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體15抗體 芳香酯1(對氧磷)封閉多肽 小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab) 試劑盒 ELISA

胰島生長因子樣家族成員4抗體 熱休克蛋白90β2封閉多肽 大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα) ELISA檢測試劑盒

磷脂酰肌醇激抗體 脫氧核糖磷醛縮樣封閉多肽 小鼠抗核抗體(ANA) ELISA Kit
人乳腺成纖維細(xì)胞小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠宮頸上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠宮頸上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠子宮內(nèi)膜干細(xì)胞英文名稱:小鼠子宮內(nèi)膜干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠附睪上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠附睪上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠子宮微血管內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:小鼠子宮微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠陰道真皮成纖維細(xì)胞英文名稱:小鼠陰道真皮成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告


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