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人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 11:36:08瀏覽次數(shù):279

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 椎間盤(pán)組織
人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H520人肺鱗癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106NCI-H522 人非小細(xì)胞肺癌腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106NCI-H524人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106NCI-H661[h661]人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106NCI-H716人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

椎間盤(pán)組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離椎間盤(pán)組織;椎間盤(pán)是位于脊柱兩椎體之間,分為中央部的髓核,富于彈性的膠狀物質(zhì);周?chē)康睦w維環(huán),由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板,是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來(lái)。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。髓核,是乳白色半透明膠狀體,富于彈性,為椎間盤(pán)結(jié)構(gòu)的一部分,位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯(cuò)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時(shí)期的髓核含水量為80%-90%,即使到了老年,其含水量也在70%上下。髓核在出生時(shí)體積大而松散,位于椎間盤(pán)的中央,至成年時(shí)位置移至椎間盤(pán)的中后部;在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨,隨著年齡的增長(zhǎng),髓核中的蛋白多糖解聚增多,水分逐漸減少,膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    3-4天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

11-β-羥基類(lèi)固醇脫氫3抗體 高密度脂蛋白受體/清道夫受體封閉多肽 人白介受體相關(guān)激(IRAK)ELISA試劑盒

沉默調(diào)節(jié)樣蛋白SirT7抗體 黑色瘤相關(guān)抗原B6封閉多肽 人(UK)試劑盒ELISA

細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體 選擇連接蛋白32封閉多肽 人磷烯醇式羧激(PCK)ELISA檢測(cè)試劑盒

原癌基因蛋白c-kit(CD117)抗體 FAS凋亡抑制分子1封閉多肽 人胰(trypsin)elisa試劑盒

生長(zhǎng)激釋放因子受體抗體 FAM43B蛋白封閉多肽 人β位淀粉樣前體蛋白裂解1(BACE1)試劑盒elisa

19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框80單克隆抗體 突觸泡蛋白2A封閉多肽 人蛋白二硫化物異構(gòu)前體(PDI)檢測(cè)試劑盒elisa

抑制α/Inhibin α抗體 磷化離子型谷氨受體1封閉多肽 人蛋白二硫化物異構(gòu)A3(PDIA3)ELISA試劑盒

英文名稱(chēng): CCR7 降鈣基因相關(guān)肽1型受體封閉多肽 人脫氫(SDH)試劑盒ELISA

粘蛋白4抗體 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框37封閉多肽 人肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)(PPI)ELISA檢測(cè)試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體GPR92蛋白抗體 微管相關(guān)蛋白2封閉多肽 人鳥(niǎo)氨氨基甲酰轉(zhuǎn)移(OCT)elisa試劑盒

骨保護(hù)蛋白/護(hù)骨抗體 線粒體內(nèi)膜蛋白封閉多肽 人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨抑制劑(vaspin)試劑盒elisa

CD38抗體 指轉(zhuǎn)錄因子Slug+SNAIL封閉多肽 人蛋白磷(PP)檢測(cè)試劑盒elisa

基質(zhì)金屬3抗體 AlkB同源蛋白8封閉多肽 人硫氧還蛋白還原(TrxR)ELISA試劑盒

胰脂肪相關(guān)蛋白2抗體 嗅覺(jué)感受器蛋白11L1封閉多肽  人白細(xì)胞彈性(HLE)試劑盒ELISA

P物質(zhì)抗體 四環(huán)牛血清白蛋白偶聯(lián)物 人彈性(Elastase)ELISA檢測(cè)試劑盒

過(guò)氧化物還原4抗體 牛血清白蛋白偶聯(lián)物 人白細(xì)胞彈性(HLE)elisa試劑盒

ATP依賴RNA解旋DDX49抗體 肝臟型脂肪結(jié)合蛋白封閉多肽 人彈性(Elastase)試劑盒elisa

熱休克蛋白71抗體 軸突導(dǎo)向因子1封閉多肽 人α(AMS/AMY)檢測(cè)試劑盒elisa
人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞TJ905人腦膠質(zhì)瘤英文名稱(chēng):TJ9051×106DMEM+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

TOV-112D人上皮性卵巢癌細(xì)胞英文名稱(chēng):TOV-112D1×10642% MCDB 105 + 42% M199+15%FBS+1%P/S (培養(yǎng)周期3-4周)提供STR鑒定報(bào)告

TPC-1人乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞株英文名稱(chēng):TPC-11×1061640+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

TT人甲狀腺癌細(xì)胞英文名稱(chēng):TT1×106F-12K+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

TU212人喉癌細(xì)胞英文名稱(chēng):TU2121×106IMDM+10%FBS+1%P/S  提供STR鑒定報(bào)告

TU-138人喉癌細(xì)胞英文名稱(chēng):TU-1381×1061640+10%FBS+1%P/S  提供STR鑒定報(bào)告

U118MG(U-118MG)人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤英文名稱(chēng):U118MG(U-118MG)1×106DMEM+10%FBS+1%P/S提供STR鑒定報(bào)告


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