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人表皮黑色素細胞

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更新時間:2023-04-23 11:02:08瀏覽次數(shù):231

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 皮膚組織
人表皮黑色素細胞的相關產(chǎn)品:SMMC-7721 (人肝癌細胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人肺微血管平滑肌5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶HIC (人小腸癌細胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠大隱靜脈內皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠真皮微血管內皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人表皮黑色素細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

皮膚組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自皮膚組織;表皮位于動物皮膚的外層,由胚胎時期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構,由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層。黑色素細胞是皮膚產(chǎn)生和維持色素的主要細胞,起源于神經(jīng)嵴,后逐漸遷移到表皮和毛囊。黑色素細胞的異?;蚬δ艿氖Се铝艘幌盗须y治性色素性疾病的發(fā)生,如、黃褐斑等。表皮黑色素細胞主要分布于位于表皮的基底層,與表皮細胞共同組成表皮黑素單位,其主要功能是產(chǎn)生黑素小體保護皮膚免受損害。

5.方法簡介:

實驗室分離的先中性dan白消化、后胰dan白 - 膠原混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經(jīng)S-100免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白抗體 色氨相關蛋白3封閉多肽 

T淋巴細胞分化蛋白MAL2抗體 1號染色體開放閱讀框114封閉多肽 

RH家族B型糖蛋白RHBG抗體 烯醇化超家族成員1封閉多肽 

乳腺癌相關抗原BRCAA1抗體 辛?;X腸肽28 

細胞纖毛內轉運同源蛋白43抗體 白介17F封閉多肽 

CD8抗體 Smad蛋白相互作用蛋白1封閉多肽 

精神發(fā)育遲滯相關蛋白抗體 ZPLD1蛋白封閉多肽 

軟骨細胞蛋白39抗體 重組人白介15 (活性的, Tag free) 

張力蛋白4抗體 SHC4蛋白封閉多肽 

賴氨tRNA的連接抗體 G蛋白偶聯(lián)受體77封閉多肽 

拓普西異構Ⅰ抗體 TATA盒結合蛋白相關因子TAF1C封閉多肽 

M期磷蛋白9抗體 胞漿蛋白SH3GL3封閉多肽 

黑皮質受體5抗體 絲氨抑制劑B6封閉多肽 

膽汁鹽輸出泵抗體 磷化細胞信號轉導分子SMAD2封閉多肽 

端粒抑制因子PinX-1抗體 MED28蛋白封閉多肽 

激上調神經(jīng)腫瘤相關激抗體 硫角質封閉多肽 

白細胞介-10受體a抗體 重組人BCMA蛋白 

淋巴增強因子-1抗體 鈣激活氯通道調節(jié)蛋白4封閉多肽 
人表皮黑色素細胞DMS 114 (人肺癌細胞) (STR鑒定正確)Waymouth's MB 752/1+10%FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

BT-20 (人乳腺癌細胞) (STR鑒定正確)MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

8305C (人甲狀腺癌細胞(未分化)) (STR鑒定正確)MEM(含NEAA)+10% FBS+1%P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

BALL-1 (人B淋巴細胞急性白血病) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

SW579 [SW 579; SW-579] (人甲狀腺鱗癌細胞) (L15) (STR鑒定正確)Leibovitz's L-15+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠氣管平滑肌細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠毛囊細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

 


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