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大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 08:42:25瀏覽次數(shù):222

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 肺動(dòng)脈組織
大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔單核細(xì)胞原代細(xì)胞1×106兔DC細(xì)胞原代細(xì)胞1×106兔NK細(xì)胞原代細(xì)胞1×106兔內(nèi)皮祖細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔脾基質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自肺大動(dòng)脈組織;肺大動(dòng)脈亦稱肺動(dòng)脈干。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動(dòng)脈。肺大動(dòng)脈起于右心室,在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行,在主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈,經(jīng)肺門入肺。肺動(dòng)脈干位于心包內(nèi),為一粗短的動(dòng)脈干。起自右心室,在升主動(dòng)脈前方向左后上方斜行,至主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈。左肺動(dòng)脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進(jìn)入左肺上、下葉。右肺動(dòng)脈較長(zhǎng)而粗,經(jīng)升主動(dòng)脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進(jìn)入右肺上、中、下葉。細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布;該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布,該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白-膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肺動(dòng)脈組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

Pacific Blue標(biāo)記小鼠CD4單克隆抗體 DNAJC12蛋白封閉多肽 

胎球蛋白A 腦發(fā)育同源蛋白2封閉多肽 

英文名稱: SARS-CoV-2 () Spike RBD 甲基化組蛋白H3(di methyl K9)封閉多肽 

細(xì)胞外基質(zhì)磷化抗體 重組抗CRISPR-Cas9蛋白 

KLHDC8A蛋白抗體 磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2封閉多肽 

25α7羥化抗體 半胱氨抑制劑11封閉多肽 

內(nèi)皮細(xì)胞清道夫受體抗體 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子7封閉多肽 

血紅蛋白theta亞型1抗體 β-酪蛋白封閉多肽 

RUVBL1單克隆抗體 溶質(zhì)載體蛋白家族43成員2封閉多肽 

神經(jīng)細(xì)胞發(fā)育相關(guān)調(diào)控蛋白抗體 異檸檬脫氫gamma亞基封閉多肽 

腎母細(xì)胞瘤X蛋白抗體 趨化樣因子受體1封閉多肽 

整合樣金屬與樣1蛋白抗體 磷化絲裂原活化的蛋白激p38β封閉多肽 

英文名稱: phospho-RAF1 (Ser621) ?;拾贝济擋?封閉多肽 

錯(cuò)構(gòu)蛋白抗體 鋅指/環(huán)指蛋白1封閉多肽 

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框195抗體 生物標(biāo)記重組人血管緊張轉(zhuǎn)換2 

LARS2蛋白抗體 酯轉(zhuǎn)移蛋白封閉多肽 

NT2NL蛋白抗體 磷化干擾調(diào)節(jié)因子7封閉多肽 

真核翻譯起始因子2C2抗體 核受體共激活因子4封閉多肽 
大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞OP9細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4OP9細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持OP9細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含OP9細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于OP9細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

HA細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4HA細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持HA細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HA細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于HA細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠陰莖白膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠陰莖白膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠陰莖白膜成纖維細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠陰莖白膜成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于大鼠陰莖白膜成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

Panc 10.05細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4Panc 10.05細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持Panc 10.05細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含Panc 10.05細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于Panc 10.05細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠肌腱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠肌腱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠肌腱成纖維細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠肌腱成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于小鼠肌腱成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

小鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于小鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

PED細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4PED細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持PED細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含PED細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于PED細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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