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大鼠腹膜間皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 11:02:48瀏覽次數(shù):257

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 腹膜組織
大鼠腹膜間皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H508[H508] (人結(jié)腸直腸腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶LLC-WRC 256 [Walker 256] (大鼠腹水癌細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶NIT-1 (小鼠胰島瘤β細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人腎小球系膜細(xì)胞5×10?Cells/T

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自腹膜組織;腹膜是存在于高等脊椎動(dòng)物腹腔中的一層黏膜,主要由間皮細(xì)胞構(gòu)成,藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官,能分泌黏液潤(rùn)濕臟器的表面,減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連;腹膜也具有吸收撞擊保護(hù)內(nèi)臟的效果。腹膜(peritoneum)為全身面積大、配布復(fù)雜的漿膜,由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成,薄而光滑,呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱(chēng)為壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄層;覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱(chēng)為臟腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行,共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙,稱(chēng)為腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內(nèi)有少量漿液,在臟器活動(dòng)時(shí)可減少摩擦。腹膜間皮細(xì)胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮,是覆蓋于腹膜表面的一層細(xì)胞。間皮細(xì)胞是構(gòu)成間皮的細(xì)胞,正常大小約為15-25微米,細(xì)胞常呈圓形或者卵圓形。其功用是提供潤(rùn)滑,使器官與器官、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護(hù),不會(huì)互相磨損受傷。而間皮所生產(chǎn)的潤(rùn)滑和保護(hù)作用就是靠間皮細(xì)胞所分泌的物質(zhì)來(lái)達(dá)成,分泌物多半為細(xì)胞外基質(zhì)、玻尿suan類(lèi)物質(zhì)。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合膠原消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCK、Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠腹膜間皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腹膜組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。

聚合延伸因子抗體 孤兒核受體PAR1封閉多肽 

分泌型磷脂A2亞基5抗體 異質(zhì)核核糖核蛋白R(shí)封閉多肽 

磷化c-fos抗體 NDUFB6蛋白封閉多肽 

肌收縮蛋白MYOT抗體 胰島生長(zhǎng)因子樣家族成員2封閉多肽 

抗菌肽CAMP抗體 脫氧核糖核γ封閉多肽 

英文名稱(chēng): Human Tau-4 重組小鼠白介21蛋白 

黑色親和抗體 X連鎖Charcot-Marie-Tooth變相關(guān)蛋白封閉多肽 

KBTBD5蛋白抗體 Cy3標(biāo)記鏈霉親和 

Complexin II/復(fù)合2抗體 晶狀體上皮蛋白封閉多肽 

FER1L5蛋白抗體 脂多糖誘導(dǎo)腫瘤壞死因子α封閉多肽 

DUX3蛋白抗體 磷化氨基末端激2封閉多肽 

細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗原-4(CD152)抗體 磷化腺瘤樣息肉封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 前動(dòng)力蛋白2封閉多肽 

A型流感病毒核蛋白抗體 腎上腺髓質(zhì)(1-52)多肽 

激活激PAK7抗體 核因子1A封閉多肽 

磷化致癌基因C-Myc抗體 Smad核轉(zhuǎn)錄共抑制因子封閉多肽 

羥類(lèi)固醇脫氫17β-HSD抗體 富含亮氨跨膜纖連蛋白3封閉多肽 

同源盒蛋白Meis1抗體 鏡像多指畸形1封閉多肽 
大鼠腹膜間皮細(xì)胞小鼠乳腺成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠棕色脂肪細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠腎足突細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

BALB/3T3 clone A31 (小鼠胚胎成纖維細(xì)胞) (種屬鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

Bcap-37 (人乳腺癌細(xì)胞)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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