詳細介紹
PCR反應體系與反應條件:
玉米NOS/SSPCR檢測試劑盒規(guī)格標準的PCR反應體系
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品名稱 | 玉米NOS/SSPCR檢測試劑盒規(guī)格 |
規(guī)格 | 50T |
價格 | 電詢 |
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技術概論:
玉米NOS/SSPCR檢測試劑盒規(guī)格聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優(yōu)點;能在一個試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時內(nèi)擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR幾小時便可完成。PCR技術是生物醫(yī)學領域中的一項革命性創(chuàng)舉和里程碑。
產(chǎn)品特點:
玉米NOS/SSPCR檢測試劑盒規(guī)格PCR引物設計的目的是為了找到一對合適的核苷酸片段,使其能有效地擴增模板DNA序列。因此,引物的優(yōu)劣直接關系到PCR的特異性與成功與否。
要設計引物首先要找到DNA序列的保守區(qū)。同時應預測將要擴增的片段單鏈是否形成二級結構。如這個區(qū)域單鏈能形成二級結構,就要避開它。如這一段不能形成二級結構,那就可以在這一區(qū)域設計引物。
現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設計一對引物。一般引物長度為15-30堿基,擴增片段長度為100-600堿基對。
讓我們先看看P1引物。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%。而且四種堿基的分布隨機。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在。否則P1引物設計的就不合理。應重新尋找區(qū)域設計引物。
同時引物之間也不能有互補性,一般一對引物間不應多于4個連續(xù)堿基的互補。
引物確定以后,可以對引物進行必要的修飾,例如可以在引物的5′端加酶切位點序列;標記生物素、熒光素、等,這對擴增的特異性影響不大。但3′端不能進行任何修飾,因為引物的延伸是從3′端開始的。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位,因為密碼子第3位易發(fā)生簡并,會影響擴增的特異性與效率。
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測試劑盒間序列(探針法)綜上所述我們可以歸納十條PCR引物的設計原則:
1、玉米NOS/SSPCR檢測試劑盒規(guī)格引物應用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設計并具有特異性。
2、 產(chǎn)物不能形成二級結構。
3、引物長度一般在15~30堿基之間。
4、G+C含量在40%~60%之間。
5、堿基要隨機分布。
6、引物自身不能有連續(xù)4個堿基的互補。
7、引物之間不能有連續(xù)4個堿基的互補。
8、引物5′端可以修飾。
9、引物3′端不可修飾。
10、引物3′端要避開密碼子的第3位。
PCR引物設計的目的是找到一對合適的核苷酸片段,使其能有效地擴增模板DNA序列。如前述,引物的優(yōu)劣直接關系到PCR的特異性與成功與否。對引物的設計不可能有一種包羅萬象的規(guī)則確保PCR的成功,但遵循某些原則,則有助于引物的設計。
HAOthersH1N1甲型流感H1N1(A/Brisbane/59/2007)血凝素HA1(Hemagglutinin)人細胞裂解液(陽性對照)
人成纖維細胞裂解物HMFL
AGO3OthersHuman人AGO3/Argonaute3/EIF2C3桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液(陽性對照)
MDA-MB-453細胞,癌細胞人食管鱗癌,KYSE450細胞中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-beta2(414)CL.32pTGF-beta2(414)
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D2
小鼠正常肝細胞;NCTC1469[NCTC1469]
alphaAdaptin銜接蛋白α抗體規(guī)格:0.2ml
betaAdaptin/AP2銜接蛋白β抗體規(guī)格:0.2ml
Gamma-Adaptin銜接蛋白γ抗體規(guī)格:0.2ml
Apaf-1(CT)凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)規(guī)格:0.1ml
Apaf-1(NT)凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)規(guī)格:0.1ml
玉米NOS/SSPCR檢測試劑盒規(guī)格3-ETHYL-3-METHYLGLUTARIMIDE貝美格 規(guī)格:IND
Dequaliniumchloride地喹氯銨 規(guī)格:IND
BERBERINEACIDSULFATE硫酸氫小檗堿 規(guī)格:IND
Domiphenbromide度米芬 規(guī)格:IND
Ulipristalacetate醋酸優(yōu)力司特;醋酸烏利司他 規(guī)格:IND
Tiapridehydrochloride鹽酸硫必利 規(guī)格:IND
Methylhesperidin甲基橙皮甙 規(guī)格:IND
Molsidomine嗎多明 規(guī)格:IND
Molsidomine嗎多明 規(guī)格:IND
Mitotane;O,P'-DDDO,P-滴滴滴 規(guī)格:IND
Uracil尿嘧啶 規(guī)格:IND
Uracil尿嘧啶 規(guī)格:IND
Propanthelinebromide溴丙胺肽林 規(guī)格:IND
Tulobuterolhydrochloride鹽酸妥洛特羅 規(guī)格:IND
N-(Isoxazol-5-yl)sulphanilamide無水磷酸氫二鈉 規(guī)格:IND