小反芻獸RT-PCR檢測試劑盒圖片

PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
小反芻獸RT-PCR檢測試劑盒圖片標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 0.1～2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul

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技術(shù)概論:
小反芻獸RT-PCR檢測試劑盒圖片聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡便、重復(fù)性好、易自動化等突出優(yōu)點(diǎn)；能在一個試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時內(nèi)擴(kuò)增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷；可從一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情，用PCR幾小時便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑。
產(chǎn)品特點(diǎn):
小反芻獸RT-PCR檢測試劑盒圖片PCR引物設(shè)計的目的是為了找到一對合適的核苷酸片段，使其能有效地擴(kuò)增模板DNA序列。因此，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。
要設(shè)計引物首先要找到DNA序列的保守區(qū)。同時應(yīng)預(yù)測將要擴(kuò)增的片段單鏈?zhǔn)欠裥纬啥壗Y(jié)構(gòu)。如這個區(qū)域單鏈能形成二級結(jié)構(gòu)，就要避開它。如這一段不能形成二級結(jié)構(gòu)，那就可以在這一區(qū)域設(shè)計引物。
現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計一對引物。一般引物長度為15-30堿基，擴(kuò)增片段長度為100-600堿基對。
讓我們先看看P1引物。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%。而且四種堿基的分布隨機(jī)。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在。否則P1引物設(shè)計的就不合理。應(yīng)重新尋找區(qū)域設(shè)計引物。
同時引物之間也不能有互補(bǔ)性，一般一對引物間不應(yīng)多于4個連續(xù)堿基的互補(bǔ)。
引物確定以后，可以對引物進(jìn)行必要的修飾，例如可以在引物的5′端加酶切位點(diǎn)序列；標(biāo)記生物素、熒光素、等，這對擴(kuò)增的特異性影響不大。但3′端不能進(jìn)行任何修飾，因?yàn)橐锏难由焓菑?′端開始的。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位，因?yàn)槊艽a子第3位易發(fā)生簡并，會影響擴(kuò)增的特異性與效率。
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測試劑盒間序列(探針法）綜上所述我們可以歸納十條PCR引物的設(shè)計原則：
1、小反芻獸RT-PCR檢測試劑盒圖片引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計并具有特異性。
2、 產(chǎn)物不能形成二級結(jié)構(gòu)。
3、引物長度一般在15~30堿基之間。
4、G+C含量在40%~60%之間。
5、堿基要隨機(jī)分布。
6、引物自身不能有連續(xù)4個堿基的互補(bǔ)。
7、引物之間不能有連續(xù)4個堿基的互補(bǔ)。
8、引物5′端可以修飾。
9、引物3′端不可修飾。
10、引物3′端要避開密碼子的第3位。
PCR引物設(shè)計的目的是找到一對合適的核苷酸片段，使其能有效地擴(kuò)增模板DNA序列。如前述，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。對引物的設(shè)計不可能有一種包羅萬象的規(guī)則確保PCR的成功，但遵循某些原則，則有助于引物的設(shè)計。
人肺動脈平滑肌細(xì)胞(HPASMC)(5×105)RDFs,大鼠真皮成纖維細(xì)胞Rattus

兔主動脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-2

NGFROthersMouse小鼠NGFR/P75人細(xì)胞裂解液(陽性對照)

PK15-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)豬腎上皮細(xì)胞PK15-EGFP-puro(leiviralconsuctstablesain)porcinekidneyepithelialcellsEMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/mlpuromycin

IL13ProteinHuman重組人IL13/ALRH蛋白(Fc標(biāo)簽)

胰凝乳蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL

NUMB膜相關(guān)蛋白Numb抗體規(guī)格：0.2ml

Phospho-Numb(Ser276)磷酸化膜相關(guān)蛋白Numb抗體規(guī)格：0.1ml

Nurr1核受體相關(guān)因子-1抗體規(guī)格：0.1ml

OAS1寡腺苷酸合成酶-1規(guī)格：0.1ml

OAT-1/SLC22A6陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體規(guī)格：0.1ml
小反芻獸RT-PCR檢測試劑盒圖片D-(−)-QuinicacidD-(-)-奎寧酸   規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Capsaicin辣椒堿,辣椒素（天然提取標(biāo)準(zhǔn)品）   規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Capsaicin辣椒堿,辣椒素(天然提取)   規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Capsaicin辣椒堿,辣椒素(合成)   規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

RebaudiosideC萊苞迪甙C   規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

RebaudiosideD萊苞迪甙D   規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Geraniin老鸛草素   規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Tyrosol酪醇   規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Triptophenolide雷酚內(nèi)酯   規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Celastrol雷公藤紅素   規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Triptolide雷公藤甲素   規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Triptonide雷公藤內(nèi)酯酮   規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Acteoside類葉升麻苷,毛蕊花糖苷   規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

(-)-LicarinB利卡靈-B   規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Reserpine利血平   規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品