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人真皮淋巴上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 10:39:28瀏覽次數(shù):196

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 皮膚組織
人真皮淋巴上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:5637人膀胱癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×1068305C人甲狀腺癌細(xì)胞8305C(未分化)人細(xì)胞系1×106143B 人骨肉瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×10622RV1人前列腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106293FT人胚腎細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

人真皮淋巴上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

皮膚組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自真皮組織;真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。微血管內(nèi)皮細(xì)胞(MEC)在炎癥反應(yīng)、腫瘤生長(zhǎng)、創(chuàng)面愈合過(guò)程中起著非常重要的作用。在創(chuàng)面愈合研究領(lǐng)域,由于表皮細(xì)胞、真皮成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的成熟,人們對(duì)這兩種細(xì)胞早已進(jìn)行了大量深入的研究。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

同源盒蛋白D12抗體 干擾調(diào)節(jié)因子7封閉多肽 人原鈣黏1(PCDH1)ELISA試劑盒

ZCCHC6蛋白抗體 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框165封閉多肽 人白介2受體(IL-2R)試劑盒ELISA

RNA結(jié)合蛋白LIN28抗體 心臟肌球蛋白輕鏈2封閉多肽 人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA檢測(cè)試劑盒

CD73抗體 G蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y12封閉多肽 人胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)elisa試劑盒

熱休克蛋白90α單克隆抗體 肌管相關(guān)蛋白8封閉多肽 人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)試劑盒elisa

鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體 乙型肝炎病毒X抗原激活蛋白5封閉多肽 人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)檢測(cè)試劑盒elisa

EFCAB4B蛋白抗體 鋅指蛋白263封閉多肽 AFc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒

SHISA7蛋白抗體 KBP蛋白封閉多肽 EFc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)試劑盒ELISA

整合αV(CD51)抗體 痛覺(jué)調(diào)節(jié)肽NPFF封閉多肽 GFc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA檢測(cè)試劑盒

樁蛋白Paxillin抗體 鋅指蛋白265封閉多肽 GFc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)elisa試劑盒

Ran結(jié)合蛋白MOG1抗體 環(huán)指蛋白128封閉多肽 GFc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)試劑盒elisa

細(xì)胞角蛋白18單克隆抗體 細(xì)胞色CYP2D1封閉多肽 GFc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)檢測(cè)試劑盒elisa

蛋白質(zhì)酪氨激酶JAK2抗體 細(xì)胞表面趨化因子受體3封閉多肽 GFc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒

磷化雙微體2癌基因抗體 脂肪營(yíng)養(yǎng)PNPLA3封閉多肽 GFc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)試劑盒ELISA

煙堿型乙酰受體α9/AChRα9抗體 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白BAMBI封閉多肽 人粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體 重組大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1蛋白 人糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子(GlyCAM-1)elisa試劑盒

蛋白磷酶2調(diào)節(jié)亞基5A抗體 脂聯(lián)受體2封閉多肽 人干擾調(diào)節(jié)因子(IRF)試劑盒elisa

羰基還原酶1抗體 磷化原癌基因蛋白c-kit封閉多肽 人淋巴毒β(LTB)檢測(cè)試劑盒elisa
人真皮淋巴上皮細(xì)胞5637人膀胱癌細(xì)胞英文名稱:56371×1061640+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

8305C人甲狀腺癌細(xì)胞8305C(未分化)英文名稱:8305C1×106MEM+10%FBS+1%L-+1%NEAA+1%P/S  提供STR鑒定報(bào)告

143B 人骨肉瘤細(xì)胞英文名稱:143B 1×106MEM+10%FBS+1%NEAA+1%P/S提供STR鑒定報(bào)告

22RV1人前列腺癌細(xì)胞英文名稱:22RV11×1061640+10%FBS+1%P/S+1%鈉+1%L-提供STR鑒定報(bào)告

293FT人胚腎細(xì)胞英文名稱:293FT1×106DMEM+10%FBS+1%L-+1%NEAA+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

293T人胚腎細(xì)胞英文名稱:293T1×106DMEM+10%FBS+1%L-+1%NEAA+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

5-8F人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系英文名稱:5-8F1×106 1640+10%FBS+1%P/S   提供STR鑒定報(bào)告

 


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