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小鼠表皮成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 16:40:46瀏覽次數(shù):163

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 皮膚組織
小鼠表皮成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠胎盤(pán)間充質(zhì)干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠胚胎成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠表皮成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

皮膚組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自皮膚組織;皮膚組織來(lái)源包括頭部、臉部、手、腳、腿、背部、腹部、包皮等體表部位皮膚,可依據(jù)需求選用;表皮位于動(dòng)物皮膚的外層,由胚胎時(shí)期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用先中性dan白消化、后胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3-5代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

RAB6蛋白抗體 X染色體開(kāi)放閱讀框6封閉多肽 

間隙連接蛋白47抗體 磷化神經(jīng)色氨羥化2封閉多肽 

白細(xì)胞分化抗原CD2AP抗體 淋巴細(xì)胞磷蛋白磷相關(guān)蛋白封閉多肽 

英文名稱: ATG9A KDELR3蛋白封閉多肽 

跨膜γ羧基蛋白1抗體 胞漿型磷脂A2封閉多肽 

致癌基因N myc相互作用因子抗體 磷化雌激受體α封閉多肽 

腺苷激結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 酪氨蛋白激A4受體封閉多肽 

NT5D1蛋白抗體 酰基脫氫很長(zhǎng)鏈封閉多肽 

SHISA蛋白家族9抗體 重組人受體活性修飾蛋白1抗體 

同源盒蛋白Meis1抗體 核小體相關(guān)激HIPK1封閉多肽 

軸蛋白1抗體 G蛋白β5/Gβ 5 封閉多肽 

谷氧還蛋白/巰基轉(zhuǎn)移抗體 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3封閉多肽 

小鼠抗人CD90單克隆抗體 間生蛋白封閉多肽 

扭轉(zhuǎn)蛋白B抗體 MONDOA蛋白封閉多肽 

AKT1S1單克隆抗體 DNA損傷誘導(dǎo)蛋白1封閉多肽 

FNBP4蛋白抗體 CD164封閉多肽 

CD8抗體 選擇性剪接因子3B亞基14封閉多肽 

鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug+SNAIL抗體 Pygopus 2蛋白封閉多肽 
小鼠表皮成纖維細(xì)胞LX-2細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4LX-2細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持LX-2細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含LX-2細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于LX-2細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基100mL大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基專門(mén)為大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化而開(kāi)發(fā),針對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的特性優(yōu)化分化試劑的配方,可增加大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨分化效果。本產(chǎn)品不含血清成分,但含其他血清替代物蛋白成分,僅用于科研用途,不可用于診斷、治療、臨床及其他用途。培養(yǎng)基組成成分成分名稱添加體積(規(guī)格200ML)添加體積(規(guī)格100ML)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化基礎(chǔ)培養(yǎng)基194mL97mL鈉 SodiumPyruvate200μL100μLITS添加物 ITS+supplement1mL*21mLTGF-β31mL*21mL抗壞血 AscorbicAcid600μL300μL脯氨 Proline200μL100μL Dexamethasone20μL10μL青鏈霉 Pennicillin-Streptomycin2mL1mL染色劑阿利辛藍(lán)染液                                                      10ML/5ML      注:各成分請(qǐng)根據(jù)試劑管上標(biāo)簽標(biāo)示溫度保存。

MEM無(wú)糖(含L-丙氨酰-L-)500mL-

小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

AAV-293細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4AAV-293細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持AAV-293細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含AAV-293細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于AAV-293細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

SW620/GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基(DMEM)125mL×4SW620/GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持SW620/GFP細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SW620/GFP細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于SW620/GFP細(xì)胞的體外培養(yǎng)。


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