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人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 16:49:57瀏覽次數(shù):221

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 腹膜組織
人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔結(jié)腸平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔結(jié)腸成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔膽囊上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔肝外膽管上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腹膜組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自腹膜組織;腹膜是存在于高等脊椎動(dòng)物腹腔中的一層黏膜,主要由間皮細(xì)胞和間質(zhì)(結(jié)締組織、纖維、毛細(xì)血管、淋巴管)構(gòu)成,藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官,能分泌黏液潤(rùn)濕臟器的表面,減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連;腹膜也具有吸收撞擊保護(hù)內(nèi)臟的效果。腹膜(peritoneum)為全身面積大、配布復(fù)雜的漿膜,由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成,薄而光滑,呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄層;覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行,共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙,稱為腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內(nèi)有少量漿液,在臟器活動(dòng)時(shí)可減少摩擦。腹膜的主要生理功能:①分泌功能;②吸收功能;③再生能力;④防御功能;⑤調(diào)理功能。臟、壁腹膜都有豐富的毛細(xì)血管,毛細(xì)血管上有不同的孔徑;腹膜的毛細(xì)血管和毛細(xì)血管后靜脈是進(jìn)行溶質(zhì)交換的主要場(chǎng)所。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白聯(lián)合消化法結(jié)合化學(xué)試劑抑制法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

NUDCD2蛋白抗體 LCK相互作用膜蛋白封閉多肽 

一氧化氮合轉(zhuǎn)運(yùn)誘導(dǎo)抗體 粘結(jié)蛋白SA1封閉多肽 

細(xì)胞分化蛋白SEPT14抗體 嗅覺受體51I2封閉多肽 

頜骨成釉細(xì)胞相關(guān)蛋白抗體 FLJ38767蛋白封閉多肽 

鋅指蛋白804A抗體 磷化CD156b封閉多肽 

英文名稱: PAX8 絲裂原活化蛋白激6封閉多肽  

英文名稱: VSV-G tag 甲狀腺激轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7/8封閉多肽 

磷肌醇磷脂PLCZ1抗體 FBXO16蛋白封閉多肽 

環(huán)指蛋白21抗體 長(zhǎng)鏈脂肪酰基水解封閉多肽 

英文名稱: ALDH1L1 絲氨/蘇氨蛋白激NEK1封閉多肽 

9號(hào)染色體開放閱讀框78抗體 DNA1樣蛋白1封閉多肽 

磷化微管相關(guān)蛋白抗體 組織K封閉多肽 

神經(jīng)降壓受體2抗體 核糖體p70 S6蛋白激封閉多肽 

原鈣粘附蛋白α8抗體 T淋巴細(xì)胞CD1d封閉多肽 

磷化絲氨/蘇氨/酪氨抗體 磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體α/β封閉多肽 

PE-Cy5標(biāo)記小鼠CD4單克隆抗體 轉(zhuǎn)錄因子E2F8封閉多肽 

1號(hào)染色體開放閱讀框124抗體 核受體共激活因子5封閉多肽 

HOMER2抗體 磷化β 連環(huán)蛋白封閉多肽 
人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞M199(不含酚紅,含L-丙氨酰-L-)500mL-

McCoy's 5A培養(yǎng)基(含10%FBS)125mL×4McCoy's 5A培養(yǎng)基是Thomas McCoy等人在1959年設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,初專門用于Novikoff Hepatoma細(xì)胞的培養(yǎng)。McCoy's 5A培養(yǎng)基是改良的Basal Medium 5A,與其他培養(yǎng)基不同的是,McCoy's 5A含有還原型、細(xì)菌蛋白胨以及高濃度的葡萄糖。McCoy's 5A廣泛用于多種類型的原代細(xì)胞的培養(yǎng),如骨髓、皮膚、牙齦、腎、脾、肺、大鼠胚胎、網(wǎng)膜等。此外McCoy's 5A培養(yǎng)基還用于組織活檢培養(yǎng)、細(xì)胞建系,以及一些淋巴細(xì)胞和較難培養(yǎng)的細(xì)胞的培養(yǎng)。

小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基100mL小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基專門為小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化而開發(fā),針對(duì)小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的特性優(yōu)化分化試劑的配方,可增加小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨分化效果。本產(chǎn)品不含血清成分,但含其他血清替代物蛋白成分,僅用于科研用途,不可用于診斷、治療、臨床及其他用途。培養(yǎng)基組成成分成分名稱添加體積(規(guī)格200ML)添加體積(規(guī)格100ML)小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化基礎(chǔ)培養(yǎng)基194mL97mL鈉 SodiumPyruvate200μL100μLITS添加物 ITS+supplement1mL*21mLTGF-β31mL*21mL抗壞血 AscorbicAcid600μL300μL脯氨 Proline200μL100μL Dexamethasone20μL10μL青鏈霉 Pennicillin-Streptomycin2mL1mL染色劑阿利辛藍(lán)染液                                                      10ML/5ML      注:各成分請(qǐng)根據(jù)試劑管上標(biāo)簽標(biāo)示溫度保存。

人臍靜脈血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人臍靜脈血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人臍靜脈血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人臍靜脈血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人臍靜脈血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM高糖(含HEPES)500mL-

Reh細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4Reh細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持Reh細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含Reh細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于Reh細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

RS1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4RS1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持RS1細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含RS1細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于RS1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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