賽默飛紅外顯微鏡幾經(jīng)更新?lián)Q代,已由早的普通紅外顯微鏡發(fā)展到了逐點(diǎn)掃描紅外顯微鏡,又發(fā)展到現(xiàn)在應(yīng)用的線(xiàn)掃描或面掃描紅外顯微鏡。由于紅外顯微鏡具有放大和聚焦作用,所以它照射到樣品上的有效紅外光斑直徑可以小到100~200微米,這就為采集微量樣品或樣品表面微區(qū)的紅外光譜提供了可能,而且能夠得到高質(zhì)量的紅外光譜。所以紅外顯微鏡在化學(xué)、生物學(xué)、材料科學(xué)、礦物學(xué)、醫(yī)學(xué)和法庭科學(xué)等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。
1、系統(tǒng)組成:
紅外顯微鏡是將紅外光譜儀與光學(xué)顯微鏡聯(lián)用的系統(tǒng)。主要由紅外主機(jī)、紅外顯微鏡系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)組成。紅外顯微鏡由于其精密性,多采用干涉原理,主要部件包括邁克爾遜干涉儀、顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)、檢測(cè)器等。
由紅外光源發(fā)出的光經(jīng)分束器分為兩束光,一束由動(dòng)鏡經(jīng)分束器反射到樣品后進(jìn)入檢測(cè)器;另一束由定鏡反射經(jīng)分束器、樣品后到檢測(cè)器,兩束光作用于樣品,并在檢測(cè)器處發(fā)生干涉。干涉儀將光源來(lái)的信號(hào)經(jīng)過(guò)樣品后以干涉圖的形式送往計(jì)算機(jī)進(jìn)行傅里葉變換的數(shù)學(xué)處理,zui后將干涉圖還原為光譜圖。
2、工作原理:
樣品放置在紅外顯微鏡的載物臺(tái)上,光譜儀產(chǎn)生光束射向并聚焦到待測(cè)樣品,可以進(jìn)行上下高度的光路聚焦。通過(guò)調(diào)節(jié)載物臺(tái)X軸和Y軸以及調(diào)節(jié)光柵,可以確定測(cè)試的樣品以及樣品中不同的微區(qū)。
紅外顯微鏡檢測(cè)器測(cè)量出顆粒的光譜反射光束,從而對(duì)樣品進(jìn)行點(diǎn)、線(xiàn)、面的分子水平的掃描,可以快速、自動(dòng)獲得大量的紅外光譜圖,并把測(cè)量點(diǎn)的坐標(biāo)與對(duì)應(yīng)的紅外光譜同時(shí)存入計(jì)算機(jī)。經(jīng)過(guò)一定的數(shù)據(jù)處理便得到不同化學(xué)官能團(tuán)及化合物在微區(qū)分布的三維立體圖或平面圖,并以彩色圖像的形式顯示在屏幕上。不同顏色代表該區(qū)域某一基團(tuán)的吸光度不同。
通過(guò)成分圖像分析,可以獲得樣品的空間分辨紅外譜圖和某一微小區(qū)域內(nèi)成分圖像,從而可以分析樣品在各掃描微區(qū)的組分及結(jié)構(gòu)特征,因此可以表征樣品的結(jié)構(gòu)、官能團(tuán)的空間分布及其變化等。
3、測(cè)量方式:
紅外顯微鏡按其光路系統(tǒng)的差異,一般分為非同軸光路紅外顯微鏡和同軸光路紅外顯微鏡兩大類(lèi)。非同軸光路紅外顯微鏡是較早推出使用的一類(lèi)紅外顯微鏡,具有透射式和反射式兩種操作功能。同軸光路紅外顯微鏡是另一類(lèi)紅外顯微鏡,也具有透射式和反射式兩種操作模式。也可以采用衰減全反射模式,它采用的是硅晶體。
根據(jù)紅外顯微鏡所測(cè)樣品的形態(tài)、性質(zhì)和測(cè)試要求,可以選擇透射、反射、衰減全反射三種測(cè)試模式。透射模式是測(cè)定樣品的主要方法,可提供*的信噪比,適應(yīng)于測(cè)試透光性較好的樣品,如厚度小于20μm的薄膜、固體切片;反射模式是效率較高的一種測(cè)試方法,適應(yīng)于測(cè)定背景比較光亮、光反射較強(qiáng)的樣品,如微小顆粒樣片;衰減全反射模式,在某些情況下是*的一種測(cè)量方法,適應(yīng)于測(cè)定需進(jìn)行表面成分或表面污染物分析的樣品。
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