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品牌 貝博生物
型號(hào)
廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
所在地

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更新時(shí)間：2024-11-24 10:58:00瀏覽次數(shù)：199評(píng)價(jià)

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產(chǎn)品分類品牌分類

蛋白質(zhì)生物學(xué)

蛋白提取和裂解

細(xì)胞器分離

蛋白純化

蛋白質(zhì)濃縮和緩沖液置換

蛋白定量

蛋白凝膠電泳

免疫組織化學(xué)

全部產(chǎn)品列表

貝博生物

產(chǎn)品簡介

產(chǎn)品概述 product description 使用本產(chǎn)品可以對(duì)同一張膜進(jìn)行多次Western Blot 檢測(cè)。在室溫條件下，將用過的膜浸泡在抗體去除液中30-60 分鐘，可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后，可以使用不同的抗體進(jìn)行下一輪Western Blot 實(shí)驗(yàn)，因而可利用同一張膜進(jìn)行多次蛋白檢測(cè)。適宜從少量樣品多次檢測(cè)多種不同蛋白質(zhì)。采用這方法多次檢測(cè)同一張膜上的蛋白，能省去蛋白電泳和膜轉(zhuǎn)移等費(fèi)時(shí)費(fèi)力的步驟。用途：清除硝酸纖維素膜或PVDF 膜上結(jié)合的抗體，不影響抗原蛋白。

詳細(xì)介紹

保存溫度

2-8℃

注意事項(xiàng)

試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！

有效期

一年

使用注意事項(xiàng)

1、有許多因素影響抗體從膜洗脫，如膜類型、抗體類型和濃度及其與抗原結(jié)合特性。因此需要優(yōu)化抗體去除液中孵育膜的時(shí)間。
2、確定膜上抗體是否去除與優(yōu)化抗體去除液孵育膜的時(shí)間：用ECL工作液孵育再生后的膜約1分鐘，然后進(jìn)行X 光膠片曝光并顯影，可確定膜上的抗體是否去除。如膠片上顯示條帶，表明抗體未去除，應(yīng)繼續(xù)將膜浸泡在抗體去除液中另外孵育30-60 分鐘。然后再次ECL 檢查膜上抗體是否去除。重復(fù)此步驟直到抗體去除并確定孵育時(shí)間。
3、使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用BSA 封閉的膜上的抗體更容易被去除下來。因此準(zhǔn)備進(jìn)行再生的膜，應(yīng)該使用脫脂奶粉而不是BSA 封閉。
4、盡量避免使用干燥保存的膜，干的膜上的抗體很難被去除干凈。
5、PVDF 膜上使用的效果好于硝酸纖維素膜。
6、使用非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測(cè)，例如DAB，NBT/BCIP，不適用于本試劑。

使用方法

1、將膜充分浸泡于適當(dāng)體積的抗體去除液中，室溫孵育15-30 分鐘并不時(shí)晃動(dòng)。孵育時(shí)間的長短應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化。洗脫某些抗體需要較長的時(shí)間如30-60 分鐘。
2、用鑷子取出膜，用自備Western Blot 洗滌緩沖液快速淋洗膜一次，然后用TBST洗膜3次，每次10分鐘。
3、此時(shí)膜上抗體已去除膜已經(jīng)再生。用脫脂奶粉或BSA 封閉一小時(shí)，進(jìn)行下一輪Western Blot 實(shí)驗(yàn)。