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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>細胞分析>>細胞凋亡>> 吖啶橙染色試劑盒

吖啶橙染色試劑盒
  • 吖啶橙染色試劑盒
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具體成交價以合同協(xié)議為準
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更新時間:2025-01-11 09:16:56瀏覽次數(shù):135評價

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產品概述 product description 吖啶橙(Acridine Orange,AO)為一種熒光染料,該染料具有膜通透性,能透過細胞膜,使核DNA和RNA染色。其激發(fā)波長為488nm,吸收波長為515nm。它與細胞中DNA和RNA結合量存在差別,復合物可發(fā)出不同顏色的熒光,紅色熒光為AO-DNA(F600nm),綠色熒光為AO-RNA或單鏈DNA(F530nm)。因此,在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過正常細胞膜,使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細胞中,因染色質固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細胞使之產生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。
保存溫度
2-8℃避光
注意事項
1.本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3.樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
4.使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并清除殘留清潔劑。
5.AO有毒,避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
有效期
6個月
檢測方法
1.流式細胞儀
2.熒光顯微鏡

適用樣本
1.懸浮細胞
2.貼壁細胞
產品應用
1.流式細胞儀
2.熒光顯微鏡

試劑準備
1.PBS 緩沖液(pH7.4,實驗室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液(1X))
2.或者HBSS(Hank's Balanced Salt Solution)
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
1.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體收集至管底,避免開蓋時液體灑落。
2.細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
3.染色后立即進行分析。
4.染色時間根據(jù)不同樣本的實際染色結果做相應調整。
使用方法
1、 染色緩沖液的配制:
根據(jù)樣品數(shù)按下列比例配制染色緩沖液。 取100μL試劑B加900μL無菌去離子水稀釋,混勻即成染色緩沖液。
2、 收集樣本細胞,細胞數(shù)量在10X105個以內。
3、 用PBS洗滌細胞兩次。
4、 用500μL-1ml 染色緩沖液將細胞重懸,使細胞濃度約106個/ml。
5、 取95ul細胞懸液,加入5ul AO染色液。
6、 輕輕混勻后4℃避光孵育10-15分鐘。
7、 滴加至載玻片上,用蓋玻片封片。
8、 熒光顯微鏡檢測結果。激發(fā)波長為488nm。

結果分析 :
在熒光顯微鏡下,選用488nm激發(fā)光鏡檢:AO染色正常細胞DNA呈均勻黃色或黃綠色。當細胞凋亡時,染色質濃縮,細胞核碎裂成點狀,被染成大小不一、致密濃染的綠色顆?;螯S綠色碎片。

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