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詳細(xì)介紹
N-SIM E 超分辨率顯微鏡系統(tǒng)
分辨率媲美N-SIM的個人超分辨率顯微鏡
N-SIM E運(yùn)用結(jié)構(gòu)照明顯微鏡技術(shù),實現(xiàn)了2倍于傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡的空間分辨率(約115nm)。作為一套精簡、經(jīng)濟(jì)的超分辨率系統(tǒng),N-SIM E支持常用的激發(fā)波長和基本的成像模式,是個人實驗室的理想選擇。
● 兩倍于傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡的高分辨率
N-SIM E 結(jié)合“結(jié)構(gòu)照明顯微技術(shù)”,并搭配尼康的CFI超分辨率復(fù)消色差TIRF 100x油鏡(NA 1.49),將空間分辨率提升至傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡的近2倍(約115nm),可以觀察細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的微小細(xì)節(jié)以及它們之間的相互作用。
● 1幀/秒的時間分辨率,快速超分辨率成像
N-SIM E實現(xiàn)高速超分辨圖像獲取,時間分辨率約1秒/幀,支持活細(xì)胞高分辨成像。
● 3D-SIM模式提供Z軸超高分辨率成像
Slice 3D SIM模式用于300nmZ軸分辨率的光學(xué)斷層超分辨率成像。Stack 3D-SIM模式(選配)用于厚樣品的多層序列超分辨率成像,具有比Slice 3D-SIM模式更高的成像對比度。
尼羅紅標(biāo)記的枯草芽孢桿菌細(xì)胞膜(紅色),和GFP標(biāo)記的細(xì)胞分裂蛋白DivIVA(綠色)。超分辨率顯微鏡可以精確定位細(xì)胞分裂過程中的相關(guān)蛋白。
● 3激光多色超高分辨率成像
N-SIM E的緊湊型LU-N3-SIM 激光臺,預(yù)裝了常用的3個激光器(488/561/640),可進(jìn)行多色超分辨率成像。用于研究細(xì)胞水平多個蛋白間相互作用以及動態(tài)過程。
♦ 結(jié)構(gòu)照明顯微鏡原理
通過對覆蓋已知高空間頻率圖案所產(chǎn)生的莫爾紋進(jìn)行分析處理,可從數(shù)學(xué)上恢復(fù)標(biāo)本的亞分辨結(jié)構(gòu)。
使用高空間頻率的激光干涉照明標(biāo)本,標(biāo)本內(nèi)的亞分辨結(jié)構(gòu)產(chǎn)生莫爾條紋,這些莫爾條紋中包含標(biāo)本經(jīng)過調(diào)制的亞分辨率結(jié)構(gòu)信息。捕獲莫爾條紋并通過影像技術(shù)進(jìn)行處理,可復(fù)原未知的樣品信息,實現(xiàn)超越傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡極限的分辨率。
通過處理多個莫爾條紋影像創(chuàng)建超分辨率影像
在此處理過程中,捕獲道德莫爾條紋影像包含標(biāo)本內(nèi)微小結(jié)構(gòu)的信息。顯微鏡對結(jié)構(gòu)照明的多個相位和方向進(jìn)行捕捉,并從莫爾條紋信息中提取出“超分辨率”信息。然后顯微鏡將此信息以數(shù)學(xué)方式組合到“傅立葉”或孔徑空間中,接著將其轉(zhuǎn)換回影像孔徑,從而產(chǎn)生分辨率兩倍于傳統(tǒng)顯微鏡的影像。
使用高頻條紋照明使分辨率翻倍
高分辨率、高空間頻率信息的捕捉收到物鏡數(shù)值孔徑(NA)的限制,且超過光學(xué)系統(tǒng)孔徑的結(jié)構(gòu)孔徑頻率被去除。
通過高頻結(jié)構(gòu)化照明技術(shù)提高樣本亮度,超越傳統(tǒng)的分辨率限制,令樣本中的未知結(jié)構(gòu)清晰可見,在光學(xué)系統(tǒng)光圈內(nèi)轉(zhuǎn)顯微鏡不為人知的“超分辨率”信息。
然后此“超分辨率”信息以數(shù)學(xué)形式與物鏡捕捉到的標(biāo)準(zhǔn)信息組合在一起,從而使得NA和光學(xué)系統(tǒng)的分辨率有效翻倍。
●超分辨率顯微鏡物鏡
可配置100x或60x超分辨率物鏡,其中100x油鏡適用于固定標(biāo)本的拍攝,而60x水鏡更適合活細(xì)胞長時間成像。
超分辨率物鏡針對尼康超分辨率顯微鏡設(shè)計研發(fā),具有的光學(xué)表現(xiàn)。每顆物鏡均經(jīng)過嚴(yán)格的檢查和挑選,具有低的光學(xué)相差,確保優(yōu)異的光學(xué)性能。