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動物組織研磨和植物組織研磨的不同之處在哪里

時間:2021/9/27閱讀:2310
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在分子生物學實驗中,動物的肌肉組織、結(jié)締組織、骨組織、毛發(fā)組織等,植物的根、莖、葉、種子等均需磨碎,進而對其成分、基因與蛋白質(zhì)及結(jié)構(gòu)和功能進行研究。為了使各種組織成分在研磨過程中不易被破壞或降解,又為了使組織變硬、脆性增加,從而易于磨碎,特別是有關(guān)核糖核酸(RNA)、脫氧核糖核酸(DNA)的研磨分離提取。需要先將生物材料放置到液氮中快速冷凍,終止細胞內(nèi)外一切生物反應,同時生物材料細胞*凍硬、脆化,這樣研磨可以達到很好的破胞效果,將細胞磨成粉,使里邊的物質(zhì)釋放出來。
1.動物組織研磨(均質(zhì)):將1-2g樣品加入15ml短研磨瓶(2251-PC)中,加入2個11mm鋼珠(2156)。研磨瓶置于冷凍盒(2660)中,在液氮中預冷10分鐘。預冷處理后,上機研磨。(針對2010,為保持夾具平衡,需同時運行兩個冷凍盒)。設置研磨速度1500rpm,研磨時間2min。如果樣品必須出于低溫狀態(tài),在將樣品裝入研磨瓶之前,需在液氮中預冷凍研磨瓶。
2.植物組織研磨(分解):將50mg樣品加入2ml研磨罐中(2303-MM1),再將研磨罐置于2ml泡沫架中(2300),或者帶4mm研磨鋼珠(2150)的96孔深孔板(2200)中。上機研磨,設置研磨速度1500rpm,研磨時間1min。根據(jù)用戶方法一般需要加入裂解液或緩沖液。
 

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