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技術(shù)文章

477908-83-5,Cy7 NHS,活體研究及藥物開(kāi)發(fā)熒光染料

閱讀:618          發(fā)布時(shí)間:2018-7-25

477908-83-5,Cy7 NHS,活體研究及藥物開(kāi)發(fā)熒光染料

胺類活性染料,近紅外熒光染料,Cy7®的改進(jìn)的類似物。

近紅外熒光素可以被用來(lái)利用生物組織的近紅外窗口。在這個(gè)光譜區(qū)域,高度增強(qiáng)的組織透明度使得活體成像成為可能。該染料可用于制備CY7標(biāo)記的生物分子來(lái)進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn),如活體研究及藥物開(kāi)發(fā)相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

Cy7的特殊結(jié)構(gòu)加固了中心聚亞甲基(polymethyne)鏈的穩(wěn)定性。這種增強(qiáng)的分子結(jié)構(gòu)會(huì)使其量子產(chǎn)率較其母結(jié)構(gòu)提供20%,因此它的熒光強(qiáng)度會(huì)更大。
該試劑在標(biāo)記時(shí)需要共溶劑有機(jī)溶劑。水溶Cy7 NHS ester可以用于蛋白NIR標(biāo)記。

 

一般特性

 外觀:

green powder

分子量:

682.29

分子式:

C41H48ClN3O4

溶解性:

soluble in organic solvents (DMSO, DMF, dichloromethane), low solubility in water

質(zhì)量控制:

NMR 1H (95%) and 13C, TLC, functional testing

儲(chǔ)存條件:

Storage: 24 months after receival at -20°C in the dark. Transportation: at room temperature for up to 3 weeks. Avoid prolonged exposure to light. Desiccate.

 

光譜特性

大激發(fā)波長(zhǎng), nm:

750

在大激發(fā)波長(zhǎng)下的消光系數(shù), Lmol-1cm-1:

199000

大發(fā)生波長(zhǎng), nm:

773

熒光量子產(chǎn)率:

0.3

 

Cyanine3/5/7-藥物分子或小分子多肽用于小鼠活體成像實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)步驟如下:

SPF級(jí) BALB/C裸鼠,6~8 周齡, 18~20克, 實(shí)驗(yàn)前24 h 自由進(jìn)食、飲水。

于實(shí)驗(yàn)裸鼠腹腔內(nèi)注射2%戊ba bi妥鈉300μL(215 mg/ kg)麻醉動(dòng)物。將裸鼠俯臥位平放于小動(dòng)物多光譜活體成像系統(tǒng)的記錄暗箱中。

實(shí)驗(yàn)時(shí)將Cy7 或Cy7 標(biāo)記的生物分子或藥物DMSO 稀釋后,于裸鼠尾靜脈注射200μL( 0.5 mg/g) [用量和時(shí)間需要客戶根據(jù)自己的儀器和藥物試劑等條件優(yōu)化] ,每5min 記錄1張動(dòng)物在體內(nèi)發(fā)射熒光的成像圖片,分析熒光藥物的分布情況。對(duì)照鼠不注射藥物,進(jìn)行同時(shí)記錄。記錄結(jié)束后迅速解剖裸鼠的心、肝、脾、肺、腎等臟器,進(jìn)行成像。

Cy7 檢測(cè)時(shí)激發(fā)波長(zhǎng)700~770 nm 帶通 ,發(fā)射波長(zhǎng)790 nm 長(zhǎng)通。液晶可調(diào)諧濾光片掃描范圍 780~950 nm ,掃描步進(jìn)10 nm。曝光時(shí)間為500 ms。

不同的藥物代謝時(shí)間不一樣,注射入裸鼠體內(nèi),熒光立即分布全身,然后逐步向膀胱聚集,呈現(xiàn)顯著的腎排泄的特點(diǎn)一般4~6 小時(shí),快得只有30 分鐘;如果是骨骼等部位靶點(diǎn)的Cy7 標(biāo)記藥物,有客戶反映一周后活體成像系統(tǒng)仍能檢測(cè)到熒光成像。

器官切片觀察:將解剖的器官迅速放置于4%多聚甲醛固定4 小時(shí)以上,0%,20%,30%PBS 蔗糖依次沉底,20μm 切片,多聚賴氨酸洗過(guò)的載玻片貼片,晾干,DAPI 染色。共聚焦顯微鏡觀察,激光器為氦氖 633 nm。

 

其余N-羥基琥珀酰亞胺脂Dye NHS esters染料

Pyrenebutyric acid NHS ester

ROX NHS ester, pure 6- isomer

BDP FL NHS ester

FAM NHS ester

Cyanine3 NHS ester

Cyanine3.5 NHS ester

Cyanine5 NHS ester

Cyanine5.5 NHS ester

Cyanine7 NHS ester

Cyanine7.5 NHS ester

Sulfo-Cyanine3 NHS ester

Sulfo-Cyanine5 NHS ester

sulfo-Cyanine5 bis-NHS ester

Sulfo-Cyanine7 NHS ester

 

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