高特異性：通過生物素與親和素（avidin/streptavidin）的強特異性結合，實現(xiàn)對目標分子的精確標記。

高靈敏度：Cyanine3（CY3）是一種高亮度的熒光染料，能夠產(chǎn)生強烈的熒光信號，提高檢測靈敏度。

穩(wěn)定性好：在多種實驗條件下均能保持穩(wěn)定的熒光性能和結合能力。

低光漂白性：CY3熒光團具有較低的光漂白性，能夠在長時間成像過程中保持穩(wěn)定的熒光強度。   

基礎知識概述:   

英文名：Cy3-Biotin，Cyanine3-Biotin 

分子式：C46H65ClN6O3S 

分子量：817.56 

規(guī)格標準：1mg、5mg、10mg 

試劑廠家：陜西新研博美生物科技有限公司

相關應用：

1.細胞成像與定位：

蛋白質(zhì)追蹤：標記生物素化抗體，通過鏈霉親和素-Cy3復合物定位細胞膜受體。

核酸檢測：用于熒光原位雜交（FISH），標記生物素化DNA/RNA探針。

2.流式細胞術：

在多色分析中與Cy5/FITC等染料兼容，同時檢測細胞表面多種抗原。

3.免疫組化：

結合特異性抗體，實現(xiàn)對組織切片中特定抗原的熒光標記和定位。

4.分子互作研究：

在Pull-down實驗中，CY3-Biotin標記誘餌蛋白，結合鏈霉親和素磁珠捕獲相互作用蛋白。

5.活體與超分辨成像：

CY3耐光漂白特性適用于STORM/PALM等超分辨成像技術。

使用方法：

1.樣品準備：

細胞/組織：固定或活細胞懸液（如流式細胞術需制備單細胞懸液）。

生物分子：DNA、RNA或蛋白質(zhì)需預先純化并調(diào)整濃度。

抗體預處理：若用于免疫組化，需先使用生物素化一抗孵育樣本。

2.標記反應：

稀釋試劑：將Cyanine3-Biotin用緩沖液（如PBS）稀釋至工作濃度（通常1–10 μg/mL）。

孵育條件：將稀釋后的Cyanine3-Biotin與樣品混合，在避光環(huán)境中孵育（溫度：25–37℃；時間：30分鐘–2小時）。

特異性結合：通過生物素-親和素系統(tǒng)靶向目標分子（如蛋白質(zhì)、核酸或細胞表面受體）。

3.洗滌：

用緩沖液（如PBS）洗滌3次，每次5分鐘，去除未結合的Cyanine3-Biotin，降低背景信號。

4.檢測：

熒光顯微鏡：直接觀察樣本，使用550 nm激發(fā)光，收集570 nm發(fā)射信號。

流式細胞術：分析細胞表面或內(nèi)部標記物的表達分布。

包裝：

質(zhì)量控制：95%+