細(xì)胞分選: 單細(xì)胞分選

單細(xì)胞分選適合大多數(shù)的實(shí)驗(yàn)室

時(shí)間：2021/6/7閱讀：310

　　單細(xì)胞分選被越來(lái)越多的用戶采用，應(yīng)用于各類單細(xì)胞分析實(shí)驗(yàn)中。

如果用戶對(duì)分選的細(xì)胞要求不是很高，也不需要最終分到單個(gè)目的細(xì)胞，我們可以選擇磁珠分選。結(jié)合了磁珠的抗體去標(biāo)記細(xì)胞，讓目的細(xì)胞帶上磁珠，通過(guò)磁場(chǎng)將結(jié)合了磁珠與沒(méi)結(jié)合磁珠的細(xì)胞分離開來(lái),設(shè)備簡(jiǎn)單，只需要一塊磁鐵，不需要大型儀器，得到的細(xì)胞活性好，適合大多數(shù)的實(shí)驗(yàn)室。

　　可以在重懸細(xì)胞的時(shí)候加入1%-2%的胎牛血清，大部分流式分選儀的上樣器均沒(méi)有冷卻系統(tǒng)，要想分選后獲得比較好的細(xì)胞活性，應(yīng)盡量減少細(xì)胞在室溫的暴露時(shí)間,該方法長(zhǎng)時(shí)間分選的時(shí)候能較好地提高分選出來(lái)的細(xì)胞活性.分選的模式一般的流式分選儀上都有三種模式：純化、富集、單細(xì)胞。我們需要知道的是，流式分選是針對(duì)細(xì)胞所在的液滴進(jìn)行操作，而不是針對(duì)細(xì)胞本身。

　　使細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞狀態(tài)，防止細(xì)胞粘連，同時(shí)細(xì)胞密度不宜過(guò)大，盡量使每個(gè)液滴中只含有一個(gè)細(xì)胞，在分選之前可將細(xì)胞用含EDTA的PBS清洗，去除鈣離子，或者加入適度的DNA酶，去除死細(xì)胞DNA產(chǎn)生的粘連。

　　細(xì)胞分選出來(lái)后我們需用離心管或者流式管收集，為了保證細(xì)胞的活性，收集管里需要放置一定的培養(yǎng)液，起到緩沖作用也可以給細(xì)胞提供一定營(yíng)養(yǎng)，如果分選出來(lái)的細(xì)胞需要進(jìn)行培養(yǎng)，還可在收集管中加入一定濃度的抗生素。如果分選環(huán)境不是特別干凈，切記收集后要用含抗生素的PBS進(jìn)行清洗，再用含抗生素的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，以防止細(xì)胞污染。

　　如果對(duì)通量要求較高，同時(shí)目標(biāo)細(xì)胞有適宜的熒光標(biāo)記，可利用流式細(xì)胞儀完成單細(xì)胞分選。經(jīng)熒光染色或標(biāo)記的單細(xì)胞懸液，被高壓壓入流動(dòng)室內(nèi)，在鞘液的包裹和推動(dòng)下，細(xì)胞被排成單列，以一定速度從流動(dòng)室噴口噴出。通過(guò)相應(yīng)熒光檢測(cè)及充電，獲得目的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞分離，進(jìn)行免疫方面的研究時(shí)，流式細(xì)胞為分離單細(xì)胞方法的選擇。

單細(xì)胞分選適合大多數(shù)的實(shí)驗(yàn)室

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